D 2010

Application of reverse transcription PCR and capillary electrophoresis in the analysis of T-cell receptor beta variable repertoire

TESAŘOVÁ, Lenka, Martina PETERKOVÁ, Stanislav STEJSKAL, Michaela POTĚŠILOVÁ, Irena KRONTORÁD KOUTNÁ et. al.

Základní údaje

Originální název

Application of reverse transcription PCR and capillary electrophoresis in the analysis of T-cell receptor beta variable repertoire

Název česky

Aplikace RT-PCR a kapilární elektroforézy při analýze TCR beta variabilního repertoáru

Autoři

TESAŘOVÁ, Lenka (203 Česká republika, domácí), Martina PETERKOVÁ (203 Česká republika, domácí), Stanislav STEJSKAL (203 Česká republika, domácí), Michaela POTĚŠILOVÁ (203 Česká republika, domácí) a Irena KRONTORÁD KOUTNÁ (203 Česká republika, garant, domácí)

Vydání

Brno, Česká republika, Advances in Molecular and Cancer Biology, 2010, od s. 46-51, 6 s. 2010

Nakladatel

muni PRESS

Další údaje

Jazyk

angličtina

Typ výsledku

Stať ve sborníku

Obor

Genetika a molekulární biologie

Stát vydavatele

Česká republika

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Forma vydání

tištěná verze "print"

Kód RIV

RIV/00216224:14330/10:00045361

Organizační jednotka

Fakulta informatiky

ISBN

978-80-210-5312-0

Klíčová slova česky

RT-PCR; Kapilární elektroforéza; T-buněčný receptor; BV genové rodiny

Klíčová slova anglicky

Reverse transcription polymerase chain reaction; Capillary electrophoresis; T-cell receptor; Beta variable families

Štítky

Příznaky

Recenzováno
Změněno: 8. 4. 2014 07:50, Mgr. Lenka Tesařová, Ph.D.

Anotace

V originále

Monitoring the T-cell population diversity has demonstrated to be beneficial when evaluating an individuals immune status. BV families are most often analysed to examine this diversity. The aim of our study was to establish a method for specific determination of relative BV family expression and to evaluate its applicability in terms of multiple myeloma (MM). Peripheral blood mononuclear cells from healthy donors and MM patients were analysed by RT-PCR. PCR product amounts were determined with an Agilent 2100 Bioanalyzer utilizing capillary electrophoresis and converted to the relative BV family expression. This report provides reverse transcription PCR with primers allowing for the analysis of the entire BV family repertoire. Further it describes the utilization of capillary electrophoresis to evaluate the relative BV family expression after their amplification. The methodology is fast and simple to operate and is therefore suitable as a first screening of the T-cell population composition.

Česky

Prokázalo se, že sledovat diverzitu populace T lymfocytů je výhodné v mnoha klinických podmínkách, kdy se hodnotí stav imunitního systému jedince. Nejčastěji se analyzují BV rodiny. Cílem studie bylo zavést metodiku pro specifické stanovení relativní exprese BV rodin a vyhodnotit její použitelnost v podmínkách mnohočetného myelomu. Pomocí RT-PCR se analyzovali vzorky periferní krve od zdravých dárců a pacientů s mnohočetným myelomem. Množství PCR produktů bylo stanoveno pomocí přístroje Agilent 2100 Bioanalyzer a převedeno na relativní expresi BV rodin. Tato práce poskytuje RT-PCR s primery, které umožňují analýzu celého repertoáru BV rodin. Dále popisuje využití kapilární elektroforézy při vyhodnocení relativní exprese BV rodin po jejich amplifikaci. Metodika je rychlá a jednoduchá, tudíž vhodná na první skrínink složení populace T lymfocytů. Dokázali jsme její schopnost detekovat změny v repertoáru BV rodin u pacientů s mnohočetným myelomem v porovnání s poměrně stabilním profilem u zdravých dárců.

Návaznosti

MSM0021622430, záměr
Název: Funkční a molekulární charakteristiky nádorových a normálních kmenových buněk - identifikace cílů pro nová terapeutika a terapeutické strategie
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Funkční a molekulární charakteristiky nádorových a normálních kmenových buněk - identifikace cílů pro nová terapeutika a terapeutické strategie
2B06052, projekt VaV
Název: Vytipování markerů, screening a časná diagnostika nádorových onemocnění pomocí vysoce automatizovaného zpracování multidimenzionálních biomedicínských obrazů (Akronym: Biomarker)
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Vytipování markerů, screening a časná diagnostika nádorových onemocnění pomocí vysoce automatizovaného zpracování multidimenzionálních biomedicínských obrazů