Sample Processing and Methodological Pitfalls in Multiple Myeloma Research

POTÁČOVÁ, Anna, Jana ŠTOSSOVÁ, I. BUREŠOVÁ, Lucie KOVÁŘOVÁ, Martina ALMÁŠI, Miroslav PENKA and Roman HÁJEK. Sample Processing and Methodological Pitfalls in Multiple Myeloma Research. Klinická onkologie. 2011, vol. 24, Suppl., p. 18-23. ISSN 0862-495X.

Basic information

• Original name: Sample Processing and Methodological Pitfalls in Multiple Myeloma Research
• Name in Czech: Zpracování vzorků a metodická úskalí ve výzkumu mnohočetného myelomu
• Authors: POTÁČOVÁ, Anna (203 Czech Republic, belonging to the institution), Jana ŠTOSSOVÁ (203 Czech Republic, belonging to the institution), I. BUREŠOVÁ (203 Czech Republic), Lucie KOVÁŘOVÁ (203 Czech Republic, belonging to the institution), Martina ALMÁŠI (203 Czech Republic), Miroslav PENKA (203 Czech Republic) and Roman HÁJEK (203 Czech Republic, guarantor, belonging to the institution).
• Edition: Klinická onkologie, 2011, 0862-495X.

Other information

• Original language: English
• Type of outcome: Article in a journal
• Field of Study: 30200 3.2 Clinical medicine
• Country of publisher: Czech Republic
• Confidentiality degree: is not subject to a state or trade secret
• RIV identification code: RIV/00216224:14110/11:00049835
• Organization unit: Faculty of Medicine
• Keywords (in Czech): mnohočetný myelom; monoklonální gamapatie; separace buněk; CD138
• Keywords in English: multiple myeloma; monoclonal gammopathy; cell separation; CD138
• Tags: Reviewed

Abstract

In this paper, initial processing of biological material, cell separation algorithms and other procedures are discussed. For samples with initial infiltration of plasma cells > 5%, CD138 MicroBeads and Auto-Magnetic-Activated Cell Sorting program are used. Fluorescence-Activated Cell Sorting is used exclusively for cell populations with low-abundance; these samples are detected using fluorescently labeled antibodies only. Isolated plasma cells are further processed for molecular biological studies, for cytogenetics and protein analyses. Furthermore, this work examines the pitfalls of research related to multiple myeloma; some of them we have overcome, while the others are still problematic.

Abstract (in Czech)

V tomto úvodním článku pro ostatní metodiky využívané na našem pracovišti při studiu mnohočetného myelomu a monoklonálních gamapatií jsme se zaměřili na postupy vlastního zpracování biologického materiálu, principy separace buněk a nastavené algoritmy dalších postupů. Běžně používaná metodika magnetické separace buněk MACS je vhodná pouze pro vzorky se vstupní infiltrací plazmatickými buňkami > 5 %. Pro nízce zastoupené populace buněk pak využíváme výhradně metodu fluorescencí aktivované separace FACS. Izolované plazmatické buňky jsou dále využívány pro molekulárně biologické studie, pro cytogenetická vyšetření a k proteinovým analýzám. Dále se v této práci zmiňujeme o úskalích, která souvisejí s výzkumem mnohočetného myelomu, některá z nich již umíme překonat, s jinými se zatím neúspěšně potýkáme.

Links

• GAP304/10/1395, research and development project: Name: Analýza klonálních progenitorů plazmatických buněk u monoklonálních gamapatií

Investor: Czech Science Foundation

• GP301/09/P457, research and development project: Name: Uplatnění multiparametrické průtokové cytometrie ve studiu patofyziologie maligních plazmatických buněk

Investor: Czech Science Foundation

• LC06027, research and development project: Name: Univerzitní výzkumné centrum - Česká myelomová skupina (Acronym: LC MGUS)

Investor: Ministry of Education, Youth and Sports of the CR, University Research Centre - Czech Myeloma Group

• MSM0021622434, plan (intention): Name: Od klasických prognostických markerů ke klinicky aplikovatelným farmakogenomickým a farmakoproteomickým projektům u mnohočetného myelomu a monoklonálních gamapatií

Investor: Ministry of Education, Youth and Sports of the CR, From classic prognostic markers to clinical applications in selected pharmacogenomic and pharmacoproteomic projects in multiple myeloma and monoclonal gammapathies

• NS10207, research and development project: Name: Úloha abnormalit chromozómu 1 a kaskády NF-kappaB v patogenezi mnohočetného myelomu

Investor: Ministry of Health of the CR

• NS10406, research and development project: Name: Vytvoření prognostického panelu u pacientů s monoklonální gamapatií nejasného významu s cílem zabránění transformace v maligní onemocnění.

Investor: Ministry of Health of the CR

• NT11154, research and development project: Name: Úloha mitotické disrupce v B lymfocytech u mnohočetném myelomu

Investor: Ministry of Health of the CR