Účinok hyperglykémie na aktivitu pentózového cyklu in vitro

a 2012

Účinok hyperglykémie na aktivitu pentózového cyklu in vitro

KURICOVÁ, Katarína, Lukáš PÁCAL, Lucia KNOPFOVÁ, Josef TOMANDL, Veronika TANHÄUSEROVÁ et. al.

Základní údaje

Originální název

Účinok hyperglykémie na aktivitu pentózového cyklu in vitro

Název česky

Účinek hyperglykémie na aktivitu pentózového cyklu in vitro

Název anglicky

The effect of hyperglycemia on the activity of the pentose cycle in vitro

Autoři

KURICOVÁ, Katarína, Lukáš PÁCAL, Lucia KNOPFOVÁ, Josef TOMANDL, Veronika TANHÄUSEROVÁ a Kateřina KAŇKOVÁ

Vydání

48. Diabetologické dny v Luhačovicích, 2012

Další údaje

Typ výsledku

Konferenční abstrakt

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Organizační jednotka

Lékařská fakulta

ISSN

Klíčová slova česky

diabetes mellitus, diabetická nefropatie, hyperglykémie, tiamin, pentózový cyklus

Klíčová slova anglicky

diabetes mellitus, diabetic nephropathy, hyperglycemia, thiamin, pentose cycle

Změněno: 23. 4. 2012 10:59, Mgr. Katarína Chalásová, Ph.D.

Anotace

V originále

Úvod: Aktivácia pentózového cyklu (s kľúčovým enzýmom transketolázou, TKT) vedie k zvýšenej metabolizácii medziproduktov glykolýzy a predstavuje protektívnu metabolickú dráhu v podmienkach hyperglykémie. Aktivita TKT je závislá od kofaktoru tiamíndifosfátu (ThDP), ktorý vzniká premenou tiamínu tiamínpyrofosfokinázou (TPK). Tiamín vstupuje do bunky prostredníctvom špecifického transportéru (THTR1). Našim cieľom bolo sledovanie účinku hyperglykémie na aktivitu pentózového cyklu (expresia TKT, TPK a THTR1 a aktivita TPK) in vitro. Metódy: Ľudské obličkové bunky (HEK293) a ľudské monocyty (U937) boli pestované 7 dní za troch experimentálnych podmienok: normoglykémia (5,5 mmol/l), hyperglykémia (25 mmol/l) a hyperglykémia po dobu 24 hodín a následných 6 dní normoglykémia. THTR1 bol stanovený pomocou SDS-PAGE elektroforézy, westernového prenosu a detekciou špecifickými protilátkami. Aktivita TPK bola stanovená kinetickými metódami. Expresia génov THTR, TPK a TKT bola stanovená pomocou RT-PCR. Výsledky: Na úrovni mRNA sme nepozorovali žiadne výrazné zmeny v expresii mRNA ako odpoveď na zmenu hladiny glukózy v médiu. Výnimku tvorilo približne 2-násobné zvýšenie hladiny mRNA THTR1 v podmienkach hyperglykémie. Na úrovni proteínu sme sledovali výrazný pokles hladiny THTR1 za podmienok hyperglykémie (pokles o 45 %) i za podmienok hyperglykémie nasledovanej normoglykémiou (o 30 %). Záver: Čiastočne sme potvrdili hypotézu, že intracelulárna dostupnosť tiamínu je znížená v podmienkach hyperglykémie, expresia THTR1 sa za týchto podmienok mení. Neschopnosť zvýšiť dostupnosť tiamínu v bunke v hyperglykemických podmienkach môže viesť k vývoji hyperglykémiou-indukovaných poškodení buniek a tkanív.

Návaznosti

NT11405, projekt VaV

Název: Mikrobiologické a genetické determinanty rozvoje a progrese parodontitidy u diabetiků 1. a 2. typu a jejich reciproční vztah ke kompenzaci diabetu

Investor: Ministerstvo zdravotnictví ČR, Mikrobiologické a genetické determinanty rozvoje a progrese parodontitidy u diabetiků 1. a 2. typu a jejich reciproční vztah ke kompenzaci diabetu

Citovat

KURICOVÁ, Katarína, Lukáš PÁCAL, Lucia KNOPFOVÁ, Josef TOMANDL, Veronika TANHÄUSEROVÁ a Kateřina KAŇKOVÁ. Účinok hyperglykémie na aktivitu pentózového cyklu in vitro. In 48. Diabetologické dny v Luhačovicích. 2012. ISSN 1211-9326.

@proceedings{980403,
   author = {Kuricová, Katarína and Pácal, Lukáš and Knopfová, Lucia and Tomandl, Josef and Tanhäuserová, Veronika and Kaňková, Kateřina},
   booktitle = {48. Diabetologické dny v Luhačovicích},
   keywords = {diabetes mellitus, diabetic nephropathy, hyperglycemia, thiamin, pentose cycle},
   title = {Účinok hyperglykémie na aktivitu pentózového cyklu in vitro},
   year = {2012}
}

TY  - CONF
ID  - 980403
AU  - Kuricová, Katarína - Pácal, Lukáš - Knopfová, Lucia - Tomandl, Josef - Tanhäuserová, Veronika - Kaňková, Kateřina
PY  - 2012
TI  - Účinok hyperglykémie na aktivitu pentózového cyklu in vitro
KW  - diabetes mellitus, diabetic nephropathy, hyperglycemia, thiamin, pentose cycle
N2  - Úvod: Aktivácia pentózového cyklu (s kľúčovým enzýmom transketolázou, TKT) vedie k zvýšenej metabolizácii medziproduktov glykolýzy a predstavuje protektívnu metabolickú dráhu v podmienkach hyperglykémie. Aktivita TKT je závislá od kofaktoru tiamíndifosfátu (ThDP), ktorý vzniká premenou tiamínu tiamínpyrofosfokinázou (TPK). Tiamín vstupuje do bunky prostredníctvom špecifického transportéru (THTR1). Našim cieľom bolo sledovanie účinku hyperglykémie na aktivitu pentózového cyklu (expresia TKT, TPK a THTR1 a aktivita TPK) in vitro. Metódy: Ľudské obličkové bunky (HEK293) a ľudské monocyty (U937) boli pestované 7 dní za troch experimentálnych podmienok: normoglykémia (5,5 mmol/l), hyperglykémia (25 mmol/l) a hyperglykémia po dobu 24 hodín a následných 6 dní normoglykémia. THTR1 bol stanovený pomocou SDS-PAGE elektroforézy, westernového prenosu a detekciou špecifickými protilátkami. Aktivita TPK bola stanovená kinetickými metódami. Expresia génov THTR, TPK a TKT bola stanovená pomocou RT-PCR. Výsledky: Na úrovni mRNA sme nepozorovali žiadne výrazné zmeny v expresii mRNA ako odpoveď na zmenu hladiny glukózy v médiu. Výnimku tvorilo približne 2-násobné zvýšenie hladiny mRNA THTR1 v podmienkach hyperglykémie. Na úrovni proteínu sme sledovali výrazný pokles hladiny THTR1 za podmienok hyperglykémie (pokles o 45 %) i za podmienok hyperglykémie nasledovanej normoglykémiou (o 30 %). Záver: Čiastočne sme potvrdili hypotézu, že intracelulárna dostupnosť tiamínu je znížená v podmienkach hyperglykémie, expresia THTR1 sa za týchto podmienok mení. Neschopnosť zvýšiť dostupnosť tiamínu v bunke v hyperglykemických podmienkach môže viesť k vývoji hyperglykémiou-indukovaných poškodení buniek a tkanív.
ER  -

KURICOVÁ, Katarína, Lukáš PÁCAL, Lucia KNOPFOVÁ, Josef TOMANDL, Veronika TANHÄUSEROVÁ a Kateřina KAŇKOVÁ. Účinok hyperglykémie na aktivitu pentózového cyklu in vitro. In \textit{48. Diabetologické dny v Luhačovicích}. 2012. ISSN~1211-9326.

Podrobný výpis o publikaci