Diplomová práce

Biosensory pro detekci nukleových kyselin – srovnání možných převodníků

Biosensors for detection of nucleic acids – comparison of suitable transducers

Bc. Radka Kolínková, učo 211956
Anotace

Diplomová práce je zaměřena na studium a rozvoj biosenzorů schopných detekovat specifické cílové sekvence DNA. Důležitou součástí takového biosenzoru je biorekogniční část, kterou tvoří jednořetězcové DNA próby imobilizované na povrchu převodníku. Pro modifikaci senzorů bylo využito vysoce specifické nekovalentní interakce streptavidinu (avidinu) s biotinem. Jednotlivé převodníky piezoelektrické, elektrochemické …více

Abstract

The thesis is focused on biosensors capable of detecting specific DNA targets. Biorecognition reaction is important part of this biosensors. It is consists of a single-stranded DNA probe, which is immobilized on the surface of a suitable transducer. Highly specific noncovalent interaction of streptavidin (avidin) and biotin was used for modification of sensors with the probe. Piezoelectric, electrochemical …více

Zadání práce
Biosensory založené na detekci nukleových kyselin se stávají významným nástrojem v boji s infekčními chorobami. Požadavky na nové, rychlé a citlivé metody detekce patogenních mikroorganismů narůstají jak z důvodů nových ohrožení jako je bioterorismus (antrax), výskyt nových infekčních onemocnění (varianty chřipky) nebo mikroorganismů odolných proti antibiotikům (MRSA). Existují samozřejmě i snahy vyvinout alternativu ke stávajícím diagnostickým postupům, které z nejrůznějších důvodů nevyhovují požadavkům na rychlost, citlivost a robustnost analýzy. V diplomové práci se prozkoumají různé možnosti biosensorové detekce cílových sekvencí nukleových kyselin. Proby DNA budou imobilizovány na povrch různých převodníků (piezoelektrický krystal, sítotisková elektroda, pozlacený křemík a sensor pro povrchovou plazmonovou rezonanci, využije se buď DNA sekvence zakončená SH skupinou (spontánní monovrstva na zlatě, případně kontrola hustoty proby pomocí inertní thiosloučeniny) nebo biotinem (vazba přes avidin, pro SPR čip SA u Biacore). Vazba komplementárních, bodově mutovaných a nekomplementárních sekvencí DNA pak bude studována z hlediska kinetiky hybridizace (systém Biacore), změny frekvence a tlumení piezoelektrického sensoru a impedance elektrody (impedimetrické měření nebo cyklická voltametrie redoxní proby). Pro kontrolu průběhu hybridizace bude vyzkoušena také technika AFM pro přímou detekci duplexu, nebo detekci duplexu označeného nanočásticí zlata, magnetickou nanočásticí nebo kvantovou tečkou. Jednotlivé metodiky budou srovnány z hlediska možného bioanalytického využití pro detekci mikroorganismů.
Práce zkontrolována:
17. 5. 2011 16:09, prof. RNDr. Petr Skládal, CSc., učo 2202
Plný text práce
1,3 MB / soubor PDF
Jazyk práce
čeština čeština
Termín obhajoby
6. 6. 2011
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

prof. RNDr. Petr Skládal, CSc., učo 2202
ÚBioch Chem PřF MU

Oponent

Autor posudku dosud neidentifikován.

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.