Diplomová práce

Studium aktivity myeloperoxidázy na vrstvách imobilizovaných mukopolysacharidů

Myeloperoxidase activity on immobilized layers of mucopolysaccharides

Bc. Štěpán Solný
Anotace

Tato práce se zabývá zobrazováním vrstvy mukopolysacharidů (hyaluronanu, chondroitin sulfátu a heparinu) na nosné matrici pomocí mikroskopie atomárních sil (AFM) a pozorováním jejich interakce s enzymem myeloperoxidázou.

Abstract

This thesis is focused on high resolution imaging of mucopolysaccharides (hyaluronan, chondroitin sulphate and heparin) layers attached to mica using atomic force microscopy (AFM), as well as imaging of their interaction with enzyme myeloperoxidase.

Zadání práce
Myeloperoxidáza (MPO) je enzym obsažený v azurofilních granulích neutrofi lních granulocytů a v lyzosomech monocytů. Při aktivaci neutrofilních granulocytů ve spojitosti s fagocytózou jsou v nich vytvářeny volné radikály a další reaktivní formy kyslíku, které jsou nakonec za katalytického působení MPO přeměňovány na kyselinu chlornou, která je až padesátkrát účinnější v zabíjení mikrobů než peroxid vodíku. Při aktivaci neutrofilních granulocytů ve spojitosti s fagocytózou v nich dochází ke změnám označovaným jako respirační vzplanutí (respiratory burst). Během tohoto procesu jsou v nich vytvářeny volné radikály a další reaktivní formy kyslíku. Uplatňují se při tom specifické enzymy, obsažené v neutrofilních granulocytech. Stejné enzymy nacházíme i v monocytech a jsou aktivovány při jejich přeměně v makrofágy. Vedlejším účinkem aktivity MPO je poškozování tkání, zejména pak kardiovaskulárního systému (např. destabilizace aterosklerotického plátu). Úkolem diplomové práce je najít vhodné metody pro imobilizaci mukopolysacharidů (hyaluronan, chondroitin sulfát,...) na pevný podklad (sklo, slída, zlatá elektroda, atp.), a to způsobem který umožní studium aktivity MPO na těchto vrstvách. Pro studium aktivity budou použity zejména zobrazovací metody s vysokým rozlišením, zejména pak AFM mikroskopie a AFM spektroskopie. Pro studium kinetiky procesu pak afinitní biosensory.
Práce zkontrolována:
17. 5. 2016 09:13, Mgr. Jan Přibyl, Ph.D., učo 14922
Plný text práce
3,1 MB / soubor PDF
Jazyk práce
čeština čeština
Termín obhajoby
9. 6. 2016
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

Mgr. Jan Přibyl, Ph.D., učo 14922
NABI CSB CEITEC MU

Oponent

Mgr. Jan Víteček, Ph.D., učo 13473

Literatura

  • JABOR, A. a Janka FRANEKOVÁ. Editorial : Myeloperoxidáza. Klinická biochemie a metabolismus. Praha: Česká lékařská společnost J. E. Purkyně, 2008, roč. 16, č. 4, s. 219-221. ISSN 1210-7921.
  • JABOR, A.; Janka FRANEKOVÁ a M. KOMÍNKOVÁ. Myeloperoxidáza (MPO) : preanalytická fáze. FONS. Pardubice: STAPRO, 2008, č. 3, s. 32-35. ISSN 1211-7137.

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.