Diplomová práce

In vitro model chronických polymikrobiálních raných infekcí

In vitro model of chronic poly-mickrobial wound infections

Bc. Nikoleta Rosinová
Anotace

Chronické rány se vyznačují dlouhodobým a neúspěšným hojením, přičemž nejzávažnější případy končí fyzickým odstraněním tkáně nebo amputací. Tvorba biofilmu v ráně často vede k selhání antimikrobiální léčby. Dosud však nebyly popsány žádné obecně spolehlivé in vitro modely biofilmu chronických ran. Alginát a poloxamer jsou často používané materiály pro 3D tisk a jejich vlastnosti, jako je pórovitost …více

Abstract

Chronic wounds are characterised by prolonged and unsuccessful healing, with the most severe cases ending in physical tissue removal or amputation. Biofilm formation in the wound is largely responsible for the failure of antimicrobial treatment. However, no generally reliable in vitro models of chronic wound biofilm have been reported to date. Alginate and poloxamer are frequently used materials for …více

Zadání práce
Biofilmové infekce ran jsou komplexními polymikrobiálními komunitami bakterií a hub obklopené extracelulární matrix sestávající z proteinů, polysacharidů a bakteriální, ale i hostitelské eDNA. Matrix chrání mikroorganismy před vlastní imunitní obranou hostitele a významně zvyšuje toleranci k antimikrobiálním látkám. Předpokládá se, že biofilm stimuluje trvalou chronickou zánětlivou reakci imunitního systému. Navzdory tomu není úloha biofilmu v patogenezi chronických ran a účinek antimikrobiální terapie dobře znám. Rozvoj infekce v chronických ranách hraje důležitou roli komplikující léčbu pacientů. Přítomnost mikroorganismů v lůžku rány může vést ke stavům vyžadujícím opakované chirurgické zákroky se souvisejícím zvýšením nákladů na léčbu a snížením kvality života pacienta. Pacienti s chronickými nehojícími se ranami mohou být infikováni širokým spektrem mikroorganismů. Nejčastěji se vyskytujícími mikroorganismy u hospitalizovaných pacientů jsou koaguláza-negativní stafylokoky, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Candida spp., Pseudomonas aeruginosa a Acinetobacter spp. (Norbury et al., 2016). Ke studiu polymikrobiálních biofilmů a jejich odpovědi na antimikrobiální látky jsou nezbytné vhodné modely biofilmu. Doposud bylo vyvinuto několik modelů a modelových systémů, které napodobují chronické nehojící se rány, od Static In Vitro Wound Models, ve kterých jsou biofilmy pěstovány na agaru, poloxamerových gelech nebo celulózových matricích umístěných v Petriho miskách (Percival et al. 2007; Kim a Izadjoo 2015 a další) přes In Vitro Chronic Wound Models with Liquid Flow (Thorn a Greenman 2009 a další) až po Microfluidic Wound Models, které se připravují v mikrokanálcích (Halder et al. 2013). U těchto modelů je známo mnoho nevýhod a mnoho z těchto modelů není plně přizpůsobeno polymikrobiálnímu biofilmu jako původci infekce. Proto by zvýšení složitosti modelu přidáním více druhů mohlo zvýšit relevanci modelového systému právě pro studium polymikrobiálních raných infekcí. Žádný z výše zmíněných in vitro modelů chronických ran nevyužívá zároveň ranám odpovídající kultivační povrch, ranám odpovídající kultivační médium a rozhraní vzduch-kapalina, které by reálným podmínkám odpovídalo. Buněčné modely ran s monovrstvou buněk či 3D ekvivalenty lidské kůže (TE-HSE) (např. Haisma et al. 2013; Charles et al. 2009) také polymikrobiální infekci uspokojivě nesimulují. Studentka se ve své diplomové práci a v její teoretické části zaměří nejprve na charakterizaci polymikrobiálních společenstev raných infekcí a zhodnocení současného stavu poznání na poli in vitro modelů raných infekcí. Teoreticky i laboratorně se pak bude věnovat přípravě nejprve monomikrobiálního modelu a posléze modelu polymikrobiálního tak, aby pro studium polymikrobiálních interakcí upravila a vyvinula in vitro model chronické rány přizpůsobený právě potřebám polymikrobiálních biofilmů.
Práce zkontrolována:
5. 1. 2023 13:42, Ing. Veronika Holá, Ph.D., učo 77354
Jazyk práce
angličtina angličtina
Termín obhajoby
8. 2. 2023
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

Ing. Veronika Holá, Ph.D., učo 77354
MiÚ FN USA LF MU

Oponent

Mgr. Katarína Rebrošová, učo 358289
MiÚ FN USA LF MU

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.