Alternativa bakalářské práce

Testování protilátek pro imunochemickou detekci bakteriofága Phi812

Testing of antibodies for the immunochemical detection of bacteriophage Phi812

Elizabeth Pospíšilová
Anotace

V důsledku celosvětově narůstající antibiotické rezistence představuje fágová terapie slibnou alternativu k léčbě bakteriálních infekcí. Rychlá a citlivá detekce bakteriofágů je proto pro její další výzkum naprosto klíčová. Imunochemická metoda ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) je v této oblasti efektivní, avšak analýza intaktních virionů často naráží na omezenou citlivost a vysoké pozadí. …více

Abstract

Due to the global rise in antibiotic resistance, phage therapy represents a promising alternative for the treatment of bacterial infections. Therefore, the rapid and sensitive detection of bacteriophages is crucial for further research. While the enzymelinked immunosorbent assay (ELISA) is effective in this field, the analysis of intact virions often suffers from limited sensitivity and high background …více

Zadání alternativy bakalářské práce
Z důvodu rozšiřujícího se výskytu bakterií rezistentních vůči působení antibiotik jsou v posledních letech zkoumány alternativní strategie pro léčbu bakteriálních infekcí. Jednou z možností je využití terapeutických bakteriofágů, což jsou přirození predátoři bakterií s lytickou aktivitou vůči svému bakteriálnímu hostiteli. Pro využití v terapii je důležité znát farmakokinetiku fágového preparátu, pro jejíž určení je nezbytná schopnost citlivé detekce bakteriofágů. Jednou z možností detekce jsou imunochemické metody, které využívají schopnosti protilátek specificky rozpoznávat cílový antigen. Dostupnost komerčních protilátek proti bakteriofágům je však omezená, a tak je nutné pro řadu bakteriofágů připravovat protilátky vlastní.
Cílem tohoto bakalářského projektu bude otestování nových polyklonálních a monoklonálních protilátek proti bakteriofágovi Phi812 s ohledem na jejich potenciální využíti v imunochemických stanoveních. K testování budou využity dvě formy imunostanovení v mikrotitrační destičce – enzymové stanovení ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) a stanovení využívající značky na bázi foton-upkonvrzních nanočástic ULISA (upconversion-linked immunosorbent assay). V první fázi dojde k charakterizaci a otestování funkčnosti jednotlivých značek, především konjugátů streptavidinu s křenovou peroxidázou a upkonverzními nanočásticemi. Pro vlastní testování protilátek dojde k modifikaci povrchu mikrotitrační destičky bakteriofágem a následné inkubaci s jednotlivými protilátkami; bude srovnána detekce využívající nemodifikované protilátky s následnou vazbou sekundárních protilátek a detekce založená na biotinylovaných anti-bakteriofágových protilátkách a bude otestováno enzymové i upkonverzní značení. Po výběru nejlepších protilátek proběhne jejich otestování v sendvičovém formátu detekce s cílem prokázat, zda jsou tyto protilátky vhodné pro detekci bakteriofága Phi812 v klinických vzorcích.
Práce zkontrolována:
15. 5. 2026 09:02, doc. Mgr. Zdeněk Farka, Ph.D., učo 357740
Plný text práce
955,9 KB / soubor PDF
Jazyk alternativy bakalářské práce
čeština čeština
Termín rozpravy
25. 6. 2026
Rozprava proběhla úspěšně

Vedoucí

doc. Mgr. Zdeněk Farka, Ph.D., učo 357740
ÚBioch Chem PřF MU

Zpravodaj

doc. Ing. Martin Mandl, CSc., učo 1408
ÚBioch Chem PřF MU

Konzultant

Mgr. Eliška Macháčová
ÚBioch Chem PřF MU

Literatura

  • BRANDMEIER, Julian; Saara KUUSINEN; Zdeněk FARKA; Tero SOUKKA a Hans-Heiner GORRIS. Upconversion-Linked Branched DNA Hybridization Assay for the Detection of Bacteriophage M13. Advanced Optical Materials. Weinheim: Wiley-VCH, 2025, roč. 13, č. 2, s. 1-9. ISSN 2195-1071. Dostupné z: https://doi.org/10.1002/adom.202402041.

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.