Zástupci rodu Cryptosporidium (Cryptosporidiidae, Apicomplexa) jsou lékařsky a veterinárně významní parazitičtí prvoci, kteří infikují především gastrointestinální trakt všech tříd obratlovců včetně člověka. Způsobují průjmové onemocnění, tzv. kryptosporidiózu, která dodnes představuje globální zdravotní problém. Díky svému unikátnímu epicelulárnímu způsobu přichycení k hostitelské buňce jsou považovány za pozoruhodnou skupinu v rámci kmene Apicomplexa. Je pravděpodobné, že právě jejich neobvyklá lokalizace v parazitoforním vaku na povrchu hostitelské buňky je příčinou neúspěšných aplikací chemoterapeutik, běžně využívaných při infekcích příbuznými parazity. Pro účely testování různých léčebních přístupů je zapotřebí vyvinout funkční in vitro systém pro úspěšnou kultivaci těchto parazitů. Navzdory četným studiím popisujících pokusy o kultivaci těchto parazitů v podmínkách in vitro na buněčných či axenických kulturách, dosažení kompletního vývoje (produkce oocyst) i nadále představuje hlavní překážku v plnohodnotném využívání in vitro systémů při výzkumu biologických aspektů kryptosporidií či účinnosti aplikace léčivých látek. Mimo to, práce pojednávací o axenickém vývoji kryptosporidií jsou stále považovány za kontroverzní a mnohé laboratoře neuspěli při pokusech zopakovat kultivaci na bezbuněčných kulturách na základě publikovaných protokolů. Účelem zadané diplomové práce je otestovat a vyhodnotit úspešnost kultivace kryptosporidií v podmínkách in vitro na buněčných a bezbuněčných kulturách. Cíle práce: 1. Navázat na výsledky bakalářské práce a pokusit se vylepšit úspěšnost kultivace kryptosporidií na buněčných kulturách. Úspešnost kultivace vyhodnotit pomocí mikroskopických metod. 2. Na základě publikovaných protokolů, otestovat možnosti bezbuněčných (axenických) kultur pro kultivaci kryptosporidií. Úspešnost kultivace vyhodnotit pomocí mikroskopických metod. Doporučená odborná literatura: 1) Sterling, C.R. & Arrowood, M.J. (1993): Cryptosporidia. In: Kreier, J.P. (Ed.). Parasitic Protozoa, Vol. 4 (2nd ed., pp. 159-225). Academic Press Inc., New York. 2) Fayer, R. & Xiao, L. (Eds.) (2008): Cryptosporidium and Cryptosporidiosis (2nd ed.). Boca Raton, FL. CRC Press. 3) Long, P.L. (Ed.) (1982): The biology of the coccidia. Edward Arnold Press, London. 4) Bonifacino, J.S., Dasso, M., Harford, J.B. & Lippincott-Schwartz, K. (Eds.) (2004). Short protocols in cell biology: a compendium of methods from current protocols in cell biology. John Wiley & Sons, New Persey, U.S.A. 5) Edwards, H. (2012): The 100 Faces of Cryptosporidium parvum. PhD thesis, Murdoch University