Toxiny sinic (cyanotoxiny) představují významnou skupinu kontaminantů životního prostředí. Z hlediska rizik pro lidské zdraví jsou za nejproblematičtější považovány sinicové toxiny microcystiny a cylindrospermopsin. Tyto látky působí primárně hepatotoxicky, případně hepatokarcinogenně, avšak mohou negativně ovlivňovat rovněž buňky dalších tkání a orgánů, např. ledvin, gastrointestinálního traktu, nervové nebo imunitní soustavy. Tkáňově-specifické a orgánově-specifické účinky jsou do značné míry podmíněny rozdíly v expresi genů zodpovědných za buněčný příjem a biotransformaci cyanotoxinů v různých typech tkání a buněk. Cílem práce bude prostudovat s využitím instrumentálních a imunochemických analytických metod kinetiku příjmu a biotransformace zájmových cyanotoxinů v in vitro experimentech s tkáňovými kulturami reprezentujícími vybrané orgány a typy buněk. Výsledky práce přinesou nové informace o schopnostech jednotlivých buněčných liniích přijímat a metabolizovat sinicové toxiny, případně o tom, jak jsou tyto procesy ovlivněny kultivačními podmínkami a dalšími faktory. Získané výsledky poskytnou nové informace o tom, do jaké míry jsou rozdíly v příjmu a biotransformaci cyanotoxinů zodpovědné za charakter a míru toxických účinků indukovaných cyanotoxiny v in vitro experimentech s jednotlivými typy buněk. Postup a cíle: 1) V rámci teoretické části diplomové práce studentka prostuduje dostupnou literaturu týkající se toxikokinetiky sinicových toxinů, zejména pak problematiky jejich buněčného příjmu a metabolismu. Dále se studentka seznámí s analytickými postupy a metodami pro stanovení sinicových toxinů. Termín: 30.3.2015, dále průběžná aktualizace 2) V rámci praktické části studentka zvládne základy práce s tkáňovými kulturami (pasážování buněk, stanovení počtu buněk, mikroskopická dokumentace, hodnocení viability) a dále základní techniky a postupy přípravy vzorků pro analytické stanovení (extrakce, SPE, mikrofiltrace) Termín: 30.3.2015 3) Realizace vlastních experimentů zaměřených na studium příjmu a transformace sinicových toxinů v in vitro experimentech se savčími tkáňovými kulturami (např. HL1hT1, WBF344…) Termín: průběžně do 30.3.2016 4) Získané teoretické poznatky a praktické výsledky studentka zpracuje přehlednou a srozumitelnou formou (tabulky, grafy) do textu diplomové práce se standardním členěním, práce bude splňovat kritéria odborného textu, přinese aktuální přehled informací týkajících se toxikokinetiky sinicových toxinů a provede diskuzi vlastních získaných výsledků ve srovnání s literaturou. Termín: finalizace teoretické části - jaro 2016, kontrola téměř finální verze práce přibližně měsíc před odevzdáním Doporučená literatura: Disertační, diplomové a bakalářské práce týkající se sinicových metabolitů nebo dospělých kmenových buněk: P. Babica, O. Adamovský, K. Bártová/Nováková – lze najít a stáhnout z IS.MUNI.CZ Odborné vědecké články z Web of Science, Scopus, Science Direct, Scholar Google apod. Více článků si studentka nalezne a stáhne sama z internetových databází. Knihy a přehledové články pojednávající o sinicových metabolitech (literatura doporučená vedoucím představuje pouze východisko pro základní orientaci v problematice, další relevantní odborné články si studentka vyhledá sama)