Diplomová práce

Vývoj, automatizace a miniaturizace metod pro charakterizaci proteinů

Development, automatization and miniaturization of methods for protein characterization

Bc. Pavel Klimeš, učo 327898
Anotace

Tato diplomová práce je zaměřena na purifikaci rekombinantních beta-D-glukosidas a jejich charakterizaci za použití přirozených substrátů včetně automatizace a miniaturizace metody. Rekombinantní beta-D-glukosidasy Zm-p60.1 standardní forma a mutanta SB2 byly exprimovány z plasmidu pRSET A s použitím expresního systému Escherichia coli BL21(DE3)pLysS-T1R. Purifikace enzymů byla provedena afinitní chromatografií …více

Abstract

This thesis is focused on the purification of recombinant beta-D-glucosidases and the measurement of their kinetics on natural substrates using a novel kinetic method. Recombinant natural form of beta-D-glucosidase Zm-p60.1 and mutant SB2 were expressed from plasmid pRSET A, using the expression system Escherichia coli BL21(DE3)pLysS-T1R. The enzymes were purified by affinity chromatography on a HisTrap …více

Klíčová slova
beta-D-glukosidasa glukosoxidasa peroxidasa Amplex Red resorufin fluorescence purifikace beta-D-glucosidase glucose oxidase peroxidase resorufine purification
Zadání práce
  1. Vývoj metod pro fluorimetrické stanovení produktů enzymových reakcí (v rámci výzkumu b-glukosidas) včetně automatizace a miniaturizace. Metody budou využívány pro skríning funkčních glukosidas a jejich substrátovou charakterizaci.
  2. Purifikace proteinů metodami FPLC.
Administrativní informace
Práce zkontrolována:
16. 5. 2013 17:12, Mgr. Pavel Mazura, Ph.D., učo 12213
Plný text práce
5,7 MB / soubor PDF
Jazyk práce
čeština čeština
Termín obhajoby
11. 6. 2013
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

Mgr. Pavel Mazura, Ph.D., učo 12213
abs PřF MU

Oponent

Autor posudku dosud neidentifikován.

Konzultant

prof. RNDr. Přemysl Lubal, Ph.D., učo 1271
ÚChem Chem PřF MU

Literatura

  • MAZURA, Pavel; Radka FOHLEROVÁ; Břetislav BRZOBOHATÝ; Nagavalli Subbanna KIRAN a Lubomír JANDA. A new, sensitive method for enzyme kinetic studies of scarce glucosides. JOURNAL OF BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL METHODS. Elsevier, 2006, roč. 68, č. 2006, s. 55-63. ISSN 0165-022X.
  • DOPITOVÁ, Radka; Pavel MAZURA; Lubomír JANDA; Radka CHALOUPKOVÁ; Petr JEŘÁBEK; Jiří DAMBORSKÝ; Tomáš FILIPI; Nagavalli S. KIRAN a Břetislav BRZOBOHATÝ. Functional analysis of the aglycone - binding site of the maize beta-glucosidase Zm-p60.1. FEBS Journal. 2008, roč. 275, č. 24, s. 6123-6135. ISSN 1742-464X.
Citovat tuto práci
Masarykova univerzita Přírodovědecká fakulta
Studijní program
Chemie
Obor

Práce na příbuzné téma

Seznam prací, které mají shodná klíčová slova.

Podobné práce

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.

  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.

  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.

  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.

  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.