B6721c Speciální metody analýzy mikroorganizmů I. -c

Přírodovědecká fakulta
jaro 2000
Rozsah
0/4/0. 0 kr. Ukončení: z.
Vyučující
doc. Ing. Bohuslav Rittich, CSc. (přednášející)
doc. RNDr. Alena Španová, CSc. (přednášející)
Garance
doc. Ing. Bohuslav Rittich, CSc.
Ústav experimentální biologie – Biologická sekce – Přírodovědecká fakulta
Kontaktní osoba: doc. Ing. Bohuslav Rittich, CSc.
Předpoklady
Cvičení je součástí předmětu B6721.
Omezení zápisu do předmětu
Předmět je nabízen i studentům mimo mateřské obory.
Mateřské obory/plány
Osnova
  • Studenti se v první části cvičení seznámí se základními metodami práce s DNA na modelu plasmidové DNA. V druhé části cvičení se seznámí s využitím polymerázové řetězové reakce při identifikaci baktérií. Náplň jednotlivých cvičení je následující: Kultivace bakteriálních buněk E. coli nesoucích plasmid pUC19. Mikroizolace plasmidové DNA. Purifikace plasmidové DNA - odstranění RNA a proteinů. Srážení DNA ethanolem. Semikvantitativní stanovení malých množství plasmidové DNA. Linearisace plasmidu pUC19 restrikčním enzymem EcoRI. Stanovení délky linearizované DNA pomocí programu Anagel. Příprava bakteriálních buněk pro izolace bakteriální DNA. Izolace bakteriální DNA. Spektrofotometrické stanovení čistoty a koncentrace DNA. Příprava PCR směsi pro specifickou amplifikaci genu Salmonella. Provedení PCR na cykleru. Detekce PCR produktu pomocí agarosové gelové elektroforézy. Provádění PCR z lyzátů bakteriálních buněk. PCR z jedné bakteriální kolonie.
Literatura
  • 1. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. (1989) Molecular Cloning. 2nd ed. CSHL Press. 2. Westermeier R. (1993) Electrophoresis in Practice. VCH Weinheim. 3. Dieffenbach C.W.and Dveksler G.S. (1995) PCR primer. CSHL Press.
Metody hodnocení
Cvičení je ukončeno zápočtem.
Navazující předměty
Další komentáře
Předmět je vyučován každoročně.
Výuka probíhá každý týden.
  • Statistika zápisu (nejnovější)
  • Permalink: https://is.muni.cz/predmet/sci/jaro2000/B6721c