a 2012

Metodické aspekty analýzy extracelulárních mikroRNA v moči pro účely diagnostiky urologických nádorů

MLČOCHOVÁ, Hana; Renata HÉŽOVÁ; Barbora PELTANOVÁ; Jan DOLEŽEL; Alexandr POPRACH et al.

Základní údaje

Originální název

Metodické aspekty analýzy extracelulárních mikroRNA v moči pro účely diagnostiky urologických nádorů

Název anglicky

Methodical aspects of analysis of extracellular microRNAs in urine for the purpose of diagnosticts of urological tumors

Autoři

Vydání

VIII. dny diagnostické, prediktivní a experimentální onkologie, Olomouc, 2012, 2012

Další údaje

Jazyk

čeština

Typ výsledku

Konferenční abstrakt

Obor

30200 3.2 Clinical medicine

Stát vydavatele

Česká republika

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Označené pro přenos do RIV

Ano

Kód RIV

RIV/00216224:14740/12:00062170

Organizační jednotka

Středoevropský technologický institut

ISSN

Klíčová slova česky

mikroRNA; diagnostické markery; urologické nádory; qRT-PCR

Klíčová slova anglicky

microRNA; diagnostic markers; urological tumors; qRT-PCR
Změněno: 4. 12. 2012 15:13, Mgr. Petra Vychytilová, Ph.D.

Anotace

V originále

Nádory močového měchýře, ledvin a prostaty jako nejvýznamnější urologické malignity představují v ČR přibližně 13 % nově diagnostikovaných zhoubných nádorů a podílejí se ze 3 % na celkové populační úmrtnosti. Zatímco v případě karcinomu prostaty je k dispozici účinný sérový biomarker PSA, u renálního či uroteliálního karcinomu žádný podobný biomarker není dostupný. V současné době je velmi moderním přístupem při studiu a klasifikaci solidních nádorů na molekulární úrovni analýza mikroRNA (miRNA). MiRNA jsou krátké nekódující RNA schopné post-transkripčně regulovat expresi více než poloviny genů v lidském genomu, včetně významných onkogenů či nádorových supresorů. Změny expresních profilů miRNA v nádorové tkáni, stejně jako v tělních tekutinách, jsou dnes intenzivně studovány u celé řady nádorových onemocnění včetně urologickcýh nádorů. V posledních 3 letech bylo publikováno několik prací zabývajících se možným využitím miRNA v moči pro účely diagnostiky urologických nádorů. Před použitím močových miRNA jako nové třídy biomarkerů pro onkologickou diagnostiku je ovšem nutné vyřešit celou řadu metodických aspektů jejich analýzy. Hlavním cílem naší práce bylo analyzovat vybrané miRNA (miR-125b, miR-21) v supernatantu moči metodou qRT-PCR na souboru zdravých kontrol a nastavit základní parametry analýzy, stanovit vhodnou endogenní kontrolu a ověřit stabilitu miRNA. Následně byla optimalizována metodika detekce miRNA v moči aplikována ve studiích zaměřených na identifikaci diagnostických biomarkerů u renálního a uroteliálního karcinomu. Výsledky pilotní studie jsou součástí našeho sdělení.

Anglicky

Tumors of urinary bladder, kidneys and prostate are very often in the Czech Republic and are responsible for 3% of cancer related death. This is because there is no reliable and sensitive biomarker. MicroRNAs (miRNAs) are short non-coding RNAs that post-transcriptionally regulate gene expression of more then one-half of human genes including important oncogens and tumor suppressors. Deregulated expression profiles of miRNAs have been described in tumor tissues as well as in body fluids. Recently, several papers were published analyzing miRNAs in urine in order to diagnose early stages of urological tumors. Before it will be possible to use urine miRNAs as new biomarkers, it is necessary to solve several problems and methodical approaches. The main aim of our study was to analyze expression of miR-125b and miR-21 in supernatant of urine of healthy donors using qRT-PCR and set the main parameters of analysis, find an appropriate endogenous control and vereficate the stability of miRNAs. Subsequently, the methods of detection were optimized.

Návaznosti

NT13547, projekt VaV
Název: Studium mikroRNA a genů asociovaných s procesem epiteliálně-mezenchymální tranzice jako potenciálních markerů pro predikci rizika a časný záchyt metastazování u pacientů s renálním karcinomem