Detekce cystické formy Borrelia burgdorferi s.l. u pokusných jednotek BALB/c

NEKOLOVÁ, Martina a Alena ŽÁKOVSKÁ. Detekce cystické formy Borrelia burgdorferi s.l. u pokusných jednotek BALB/c. In XXIII. konference mladých mikrobiologů Tomáškovy dny 2014. 2014. ISBN 978-80-210-6805-6.

Základní údaje

• Originální název: Detekce cystické formy Borrelia burgdorferi s.l. u pokusných jednotek BALB/c
• Název anglicky: Detection of the cystic forms of Borrelia burgdorferi s.l. to the experimental units BALB/c
• Autoři: NEKOLOVÁ, Martina (203 Česká republika, domácí) a Alena ŽÁKOVSKÁ (203 Česká republika, garant).
• Vydání: XXIII. konference mladých mikrobiologů Tomáškovy dny 2014, 2014.

Další údaje

• Originální jazyk: čeština
• Typ výsledku: Prezentace na konferencích
• Obor: 10600 1.6 Biological sciences
• Stát vydavatele: Česká republika
• Utajení: není předmětem státního či obchodního tajemství
• Kód RIV: RIV/00216224:14310/14:00082031
• Organizační jednotka: Přírodovědecká fakulta
• ISBN: 978-80-210-6805-6
• Klíčová slova anglicky: cysts; Borrelia burgdorferi; cultivation
• Štítky: AKR

Anotace

Cystická forma buněk Borrelia burgdorferi sensu lato je zkoumána již několik let. Je významná především z hlediska diagnostiky a léčby Lymeské boreliózy. Umožňuje buňkám přežití v nepříznivých podmínkách, jak během kultivace, tak i v organismu, například v průběhu antibiotické léčby pacienta. Cílem experimentů bylo zjistit schopnost cystických forem různého stáří genospecies Borrelia afzelii rekonvertovat zpět do viabilní spirální formy nejen in vitro, ale i in vivo, u cystami ošetřených laboratorních jedinců Mus musculus (BALB/c). Pro účely infikace bylo náhodně vybráno 30 samic laboratorní myši inbredního kmene BALB/c stáří 8-10 týdnů. Jednotlivé pokusné jednotky byly intraperitoneálně infikovány připravenými cystami různého stáří (3, 10 a 17 dní). Pro účely kontroly byla vytvořena také pozitivní, negativní a sonifikovaná skupina jedinců. Vždy po sedmi dnech od infikace bylo provedeno 5 odběrů krve ke zjištění hodnot specifických protilátek IgM a IgG v séru ošetřených pokusných jednotek metodou ELISA. K určení schopnosti transformace cyst zpět do spirální formy in vitro byla provedena metoda kultivace v BSK II médiu a metoda dark-field mikroskopie. Po posledním odběru byly pokusné jednotky usmrceny a provedena pitva za účelem získání orgánů pro analýzu metodou PCR. Z výsledků experimentů se nepodařilo prokázat infekčnost cystických forem in vivo, jelikož hodnoty skupin ošetřených cystami se pohybovaly na úrovni negativní kontroly. Také stáří cyst nevykazovalo na vznik imunitní odpovědi rozdílný vliv. Naopak schopnost cyst rekonvertovat zpět do spirální formy byla detekována v závislosti na stáří cystické formy. Při přípravě cystické formy byl také pozorován vznik bakteriální biofilmu borelií, jehož existence byla publikována teprve v nedávné době. Demonstrovaná kapacita cyst a tvorba biofilmu jsou důležitým aspektem, který komplikuje diagnostiku a léčbu Lymeské boreliózy.

Anotace anglicky

The ability of the bacteria Borrelia burgdorferi sensu lato viable spiral form to generate cystic form has been published for many years. But the impact of the cystic forms on the immune system of the infected individuals is not explored enough so far, nor the role of this form in the process of Lyme disease is yet understood. The aim of our study was to assess the effect of the cystic forms Borrelia burgdorferi sensu lato on the immune response in treated experimental subjects Mus musculus (BALB /c). Cystic forms of different age (3, 10 and 17 days) were prepared and injected intraperitoneally into the tested mice. The effect of the cystic forms on the immune response was monitored during a five week period using the detection of specific IgG and IgM antibodies in a serum of the infected individuals by ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay) method. No influence of the cystic forms to the level of specific antibodies was shown during the study, by comparison of the level of antibodies generated by a control group of mice immunized by Borrelia motile viable cells and a group of mice treated by Borrelia sonnified cells, which generated antibodies. The method of cultivation of the cystic forms in BSKII (Barbour-Stoenner-Kelly) medium demonstrated the ability of these forms to reconvert back into the viable spiral forms, such ability depends on the age of the cysts. With increasing age, the ability of the cysts to return to the spiral form declines. Similarly a patented method Dualdur® was carried out, where motile forms of bacteria were detected in the blood of the experimental animals. The difficulty to detect the cystic forms in samples either by ELISA or other molecular and microbiological methods hinders the diagnosis and treatment of Lyme disease. From this perspective, it is obvious that a close attention towards etiology of the cystic forms of Borrelia burgdorferi sensu lato is needed for further research.