Izolace myších monoklonálních protilátek proti OspC proteinu a identifikace vazebných epitopů

NOREK, Adam, Lubomír JANDA a Alena ŽÁKOVSKÁ. Izolace myších monoklonálních protilátek proti OspC proteinu a identifikace vazebných epitopů. In Kongres klinické mikrobiologie, infekčních nemocí a epidemiologie - KMINE 2015. 2015. ISBN 978-80-906155-3-3.

Základní údaje

• Originální název: Izolace myších monoklonálních protilátek proti OspC proteinu a identifikace vazebných epitopů
• Název anglicky: Isolation of mouse monoclonal antibodies against OspC protein and identification of binding epitopes
• Autoři: NOREK, Adam (203 Česká republika, domácí), Lubomír JANDA (203 Česká republika, domácí) a Alena ŽÁKOVSKÁ (203 Česká republika, domácí).
• Vydání: Kongres klinické mikrobiologie, infekčních nemocí a epidemiologie - KMINE 2015, 2015.

Další údaje

• Originální jazyk: čeština
• Typ výsledku: Konferenční abstrakt
• Obor: 30300 3.3 Health sciences
• Stát vydavatele: Česká republika
• Utajení: není předmětem státního či obchodního tajemství
• WWW: URL
• Kód RIV: RIV/00216224:14310/15:00084124
• Organizační jednotka: Přírodovědecká fakulta
• ISBN: 978-80-906155-3-3
• Klíčová slova anglicky: Spirochetes; Lyme borreliosis; OspC protein; mouse monoclonal antibodies

Anotace

Spirochety ze skupiny Borrelia burgdorferi sensu lato jsou závažnými původci infekčního onemocnění Lymeská borrelióza. Mezi hlavní fyziologické vlastnosti těchto spirochét patří variabilní antigenní výbava umožňující adaptaci na široké spektrum hostitelů. Jedním z nejdůležitějších antigenů, uplatňující se při přenosu na obratlovčí hostitele je lipoprotein OspC. Cílem naší práce bylo připravit rekombinantní formy OspC relevantní pro území ČR, proti těmto antigenům připravit sadu myších monoklonálních protilátek a určit vazebné epitopy rozpoznávané těmito protilátkami. Z testovaných hybridomů bylo na základě schopnosti vázat jak rekombinantních tak i přirozenéch forem OspC (B. garinii, B. burgdorferi sensu stricto, B. valaisiana a B. Afzelii) vybráno 9 linií. Produkované protilátky byly purifikovány s využitím afinitní chromatografie (protein G) a dále charakterizovány. U třech linií s nejvyšší afinitou (3F4, 2D1 a 2A9) byl identifikován rozpoznávaný epitop s využitím analýzy peptidů štěpeného antigenu vázaného na imobilizovaných protilátkách pomocí hmotnostní spektrometrie.

Anotace anglicky

Spirochetes from Borrelia burgdorferi sensu lato are originators of serious infectious diseases Lyme borreliosis. The main physiological properties of these spirochetes are variable antigenic equipment enabling adaptation to a wide spectrum of hosts. Lipoprotein OspC is one of the most important antigens using during the transmission to the host. The aim of our study was to develop recombinant forms of OspC relevant to the Czech Republic, against these antigens prepare a set of mouse monoclonal antibodies and identify binding epitopes recognized by these antibodies. From the tested hybridomas was selected 9 lines based on the ability to bind to both recombinant and natural forms of OspC (B. garinii, B. burgdorferi sensu stricto, B. valaisiana and B.afzelii). These antibodies were purified using affinity chromatography (protein G), and further characterized. In the three lines with the highest affinity (3F4, 2D1 and 2A9) were identified epitope by analyzing the peptide of cleaved antigen bound to the immobilized antibody using mass spectrometry.