2016
Differential Isotope Labeling of Glycopeptides for Accurate Determination of Differences in Site-Specific Glycosylation
PABST, Martin; Iva BENEŠOVÁ; Stephan R FAGERER; Mathias JACOBSEN; Klaus EYER et al.Základní údaje
Originální název
Differential Isotope Labeling of Glycopeptides for Accurate Determination of Differences in Site-Specific Glycosylation
Autoři
PABST, Martin; Iva BENEŠOVÁ; Stephan R FAGERER; Mathias JACOBSEN; Klaus EYER; Gregor SCHMIDT; Robert STEINHOFF; Jasmin KRISMER; Fabian WAHL; Jan PREISLER a Renato ZENOBI
Vydání
Journal of Proteome Research, Washington, American Chemical Society, 2016, 1535-3893
Další údaje
Jazyk
angličtina
Typ výsledku
Článek v odborném periodiku
Obor
10406 Analytical chemistry
Stát vydavatele
Spojené státy
Utajení
není předmětem státního či obchodního tajemství
Impakt faktor
Impact factor: 4.268
Označené pro přenos do RIV
Ano
Kód RIV
RIV/00216224:14310/16:00093930
Organizační jednotka
Přírodovědecká fakulta
UT WoS
EID Scopus
Klíčová slova anglicky
glycopeptides; stable isotope labeling; IgG; MALDI MS; LC-ESI-MS
Příznaky
Mezinárodní význam, Recenzováno
Změněno: 15. 2. 2018 22:03, prof. Mgr. Jan Preisler, Ph.D.
Anotace
V originále
We introduce a stable isotope labeling approach for glycopeptides that allows a specific glycosylation site in a protein to be quantitatively evaluated using mass spectrometry. Succinic anhydride is used to specifically label primary amino groups of the peptide portion of the glycopeptides. The heavy form ((D4C4)-C-13) provides an 8 Da mass increment over the light natural form ((H4C4)-C-12), allowing simultaneous analysis and direct comparison of two glycopeptide profiles in a single MS scan. We have optimized a protocol for an in-solution trypsin digestion, a one-pot labeling procedure, and a post-labeling solid-phase extraction to obtain purified and labeled glycopeptides. We provide the first demonstration of this approach by comparing IgGI Pc glycopeptides from polyclonal IgG samples with respect to their galactosylation and sialylation patterns using MALDI MS and LC-ESI-MS.
Návaznosti
| ED1.1.00/02.0068, projekt VaV |
| |
| EE2.3.30.0009, projekt VaV |
|