Beta-secretase kinetics detected by MALDI TOF MS

MACHÁLKOVÁ, Markéta; Jan SCHEJBAL; Zdeněk GLATZ a Jan PREISLER. Beta-secretase kinetics detected by MALDI TOF MS. In ČSHS 2017. 2017. ISBN 978-80-905045-7-8.

Základní údaje

Originální název

Beta-secretase kinetics detected by MALDI TOF MS

Název česky

Kinetika beta-sekretasy detekovaná pomocí MALDI TOF MS

Autoři

MACHÁLKOVÁ, Markéta; Jan SCHEJBAL; Zdeněk GLATZ a Jan PREISLER

Vydání

ČSHS 2017, 2017

---

Další údaje

Jazyk

angličtina

Typ výsledku

Konferenční abstrakt

Obor

10406 Analytical chemistry

Stát vydavatele

Česká republika

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Označené pro přenos do RIV

Ne

Organizační jednotka

Přírodovědecká fakulta

ISBN

978-80-905045-7-8

Klíčová slova česky

beta-sekretasa, MALDI, kinetika, hmotnostní spektrometrie

Klíčová slova anglicky

beta-secretase, MALDI, kinetics, mass spectrometry

---

Anotace

V originále

Alzheimer’s disease is a serious neurodegenerative illness affecting around 44 million people worldwide. The crucial role in disease development possibly plays the β-site APP-cleaving enzyme (β-secretase, BACE). Its overexpression leads to the production of αβ peptide (αβ42 rather than αβ40 isoform) and to the accumulation of toxic amyloid plaques in brain [1]. β-secretase activity can be measured by a commercial fluorescence resonance energy transfer (FRET) assay with fluorescently marked substrates, however, this approach is relatively insensitive and requires high concentrations of the enzyme. Alternative option is the detection of reaction products by mass spectrometry. Two distinctive techniques were established for this purpose, the first involving the capillary electrophoresis separation and electrospray mass spectrometry detection (CE-ESI MS). The advantages of this method are both sensitivity and preciseness, yet, it includes the time consuming separation step [2]. The separation may be completely omitted if using matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI), which employs UV-laser to desorb and generate ion molecules from the sample surface [3]. While MALDI is not perceived as quantitative in general, we showed that with suitable internal standard, it may represent easy and accurate method useful in enzymatic research. The Km for selected substrate and IC50 values for β-secretase inhibitor were in a good agreement with results obtained by CE-ESI MS.

---

Návaznosti

GA15-05387S, projekt VaV	Název: Laserově desorpční hmotnostní spektrometrie pro analýzu molekul a nanočástic Investor: Grantová agentura ČR, Laserově desorpční hmotnostní spektrometrie pro analýzu molekul a nanočástic
GA16-06106S, projekt VaV	Název: Vysoce efektivní systém založený na kapilární elektroforéze pro screening inhibitorů beta-sekretázy jako terapeutického cíle pro Alzheimerovu chorobu (Akronym: Alzheimer) Investor: Grantová agentura ČR, Vysoce efektivní systém založený na kapilární elektroforéze pro screening inhibitorů beta-sekretázy jako terapeutického cíle pro Alzheimerovu chorobu
LQ1601, projekt VaV	Název: CEITEC 2020 (Akronym: CEITEC2020) Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, CEITEC 2020
MUNI/A/1278/2016, interní kód MU	Název: Podpora biochemického výzkumu v roce 2017 Investor: Masarykova univerzita, Podpora biochemického výzkumu v roce 2017, DO R. 2020_Kategorie A - Specifický výzkum - Studentské výzkumné projekty