Beta-secretase kinetics detected by MALDI TOF MS

MACHÁLKOVÁ, Markéta, Jan SCHEJBAL, Zdeněk GLATZ a Jan PREISLER. Beta-secretase kinetics detected by MALDI TOF MS. In ČSHS 2017. 2017. ISBN 978-80-905045-7-8.

Základní údaje

• Originální název: Beta-secretase kinetics detected by MALDI TOF MS
• Název česky: Kinetika beta-sekretasy detekovaná pomocí MALDI TOF MS
• Autoři: MACHÁLKOVÁ, Markéta, Jan SCHEJBAL, Zdeněk GLATZ a Jan PREISLER.
• Vydání: ČSHS 2017, 2017.

Další údaje

• Originální jazyk: angličtina
• Typ výsledku: Konferenční abstrakt
• Obor: 10406 Analytical chemistry
• Stát vydavatele: Česká republika
• Utajení: není předmětem státního či obchodního tajemství
• Organizační jednotka: Přírodovědecká fakulta
• ISBN: 978-80-905045-7-8
• Klíčová slova česky: beta-sekretasa, MALDI, kinetika, hmotnostní spektrometrie
• Klíčová slova anglicky: beta-secretase, MALDI, kinetics, mass spectrometry

Anotace

Alzheimer’s disease is a serious neurodegenerative illness affecting around 44 million people worldwide. The crucial role in disease development possibly plays the β-site APP-cleaving enzyme (β-secretase, BACE). Its overexpression leads to the production of αβ peptide (αβ42 rather than αβ40 isoform) and to the accumulation of toxic amyloid plaques in brain [1]. β-secretase activity can be measured by a commercial fluorescence resonance energy transfer (FRET) assay with fluorescently marked substrates, however, this approach is relatively insensitive and requires high concentrations of the enzyme. Alternative option is the detection of reaction products by mass spectrometry. Two distinctive techniques were established for this purpose, the first involving the capillary electrophoresis separation and electrospray mass spectrometry detection (CE-ESI MS). The advantages of this method are both sensitivity and preciseness, yet, it includes the time consuming separation step [2]. The separation may be completely omitted if using matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI), which employs UV-laser to desorb and generate ion molecules from the sample surface [3]. While MALDI is not perceived as quantitative in general, we showed that with suitable internal standard, it may represent easy and accurate method useful in enzymatic research. The Km for selected substrate and IC50 values for β-secretase inhibitor were in a good agreement with results obtained by CE-ESI MS.

Návaznosti

• GA15-05387S, projekt VaV: Název: Laserově desorpční hmotnostní spektrometrie pro analýzu molekul a nanočástic

Investor: Grantová agentura ČR, Laserově desorpční hmotnostní spektrometrie pro analýzu molekul a nanočástic

• GA16-06106S, projekt VaV: Název: Vysoce efektivní systém založený na kapilární elektroforéze pro screening inhibitorů beta-sekretázy jako terapeutického cíle pro Alzheimerovu chorobu (Akronym: Alzheimer)

Investor: Grantová agentura ČR, Vysoce efektivní systém založený na kapilární elektroforéze pro screening inhibitorů beta-sekretázy jako terapeutického cíle pro Alzheimerovu chorobu

• LQ1601, projekt VaV: Název: CEITEC 2020 (Akronym: CEITEC2020)

Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, CEITEC 2020

• MUNI/A/1278/2016, interní kód MU: Název: Podpora biochemického výzkumu v roce 2017

Investor: Masarykova univerzita, Podpora biochemického výzkumu v roce 2017, DO R. 2020_Kategorie A - Specifický výzkum - Studentské výzkumné projekty