2017
Electrophoretically mediated microanalysis for simultaneous on-capillary derivatization of standard amino acids followed by micellar electrokinetic capillary chromatography with laser-induced fluorescence detection
CELÁ, Andrea, Aleš MÁDR a Zdeněk GLATZZákladní údaje
Originální název
Electrophoretically mediated microanalysis for simultaneous on-capillary derivatization of standard amino acids followed by micellar electrokinetic capillary chromatography with laser-induced fluorescence detection
Název česky
Elektroforeticky zprostředkovaná mikroanalýza pro současnou derivatizaci standardních aminokyslin v kapiláře následovaná micelární elektrokinetickou kapilární chromatografií s laserem-indukovanou fluorescenční detekcí
Autoři
CELÁ, Andrea (203 Česká republika, domácí), Aleš MÁDR (203 Česká republika, domácí) a Zdeněk GLATZ (203 Česká republika, domácí)
Vydání
Journal of Chromatography A, Amsterdam, Netherlands, Elsevier Science BV, 2017, 0021-9673
Další údaje
Jazyk
angličtina
Typ výsledku
Článek v odborném periodiku
Obor
10600 1.6 Biological sciences
Stát vydavatele
Nizozemské království
Utajení
není předmětem státního či obchodního tajemství
Impakt faktor
Impact factor: 3.716
Kód RIV
RIV/00216224:14310/17:00095072
Organizační jednotka
Přírodovědecká fakulta
UT WoS
000401394200022
Klíčová slova česky
kapilární elektroforéza; elektroforeticky zprostředkovaná mikroanalýza; aminokyseliny; derivatizace v kapiláře; metabolomika lidských embryí; příčná difuze v laminárním toku
Klíčová slova anglicky
Capillary electrophoresis; Electrophoretically mediated microanalysis; Amino acids; On-capillary derivatization; Human embryo metabolomics; Transverse diffusion of laminar flow profiles
Příznaky
Mezinárodní význam, Recenzováno
Změněno: 6. 2. 2019 11:52, prof. RNDr. Zdeněk Glatz, CSc.
V originále
Amino acids are crucial compounds involved in most biochemical processes essential for life. Since their dynamic turnover reflects the actual physiology of the cell/organism, a turnover assessment may provide valuable information related to multiple physiological and pathophysiological conditions. The sensitive determination of amino acids is predominantly associated with their derivatization which might be laborious, time-consuming and difficult to standardize. However, capillary electrophoresis offers the automatic injection and mixing of reactants, incubation of the reaction mixture, separation and detection of the reaction products in one on-capillary procedure. Among the on-capillary mixing strategies, electrophoretically mediated microanalysis (EMMA) is superior in terms of mixing efficiency. In this paper, we present an optimization of EMMA for the simultaneous derivatization of standard amino acids by naphthalene-2,3-dicarboxaldehyde/NaCN and its application to targeted human embryo metabolomics. For such a purpose, novel separation conditions were developed involving the background electrolyte, comprised of 73 mM sodium dodecyl sulfate, 6.7 % (v/v) 1-propanol, 0.5 mM (2-hydroxypropyl)-beta-cyclodextrin and 135 mM boric acid/sodium hydroxide buffer (pH 9.00). Finally, the optimized EMMA was compared to a fundamentally different mixing strategy, namely the transverse diffusion of laminar flow profiles, and proved to be also suitable for human plasma analysis.
Česky
Aminokyseliny jsou pro život nezbytné biomolekuly, které jsou zapojeny v mnoha biochemických procesech. Jelikož jejich dynamické změny odráží aktuální fyziologii buňky/organismu, stanovení těchto změn poskytuje cenné informace vypovídající o mnoha fyziologických a patofyziologických stavech. Citlivé stanovení aminokyselin je nejčastěji spojováno s jejich derivatizací, jež bývá pracná, časově náročná a obtížně standardizovatelná. Kapilární elektroforéza ale umožňuje automatické dávkování a míchání reaktantů, inkubaci reakční směsi, separaci a detekci produktů reakce v jednom procesu probíhajícím přímo v kapiláře. Elektroforeticky zprostředkovaná mikroanalýza (EMMA) vyniká oproti ostatním stategiím míchání reaktantů v kapiláře vyšší účinností míchání. V tomto článku je představena optimalizace metody EMMA pro současnou derivatizaci standardních aminokyselin naftalen-2,3-dikarboxaldehydem/NaCN a její aplikace pro cílenou metabolomiku lidských embryí. K tomuto účelu byly vyvinuty nové separační podmínky se složením základního elektrolytu 73 mM dodecylsulfát sodný, 6.7 % (v/v) 1-propanol, 0.5 mM (2-hydroxypropyl)-beta-cyklodextrin a 135 mM kyselina boritá/hydroxid sodný (pH 9.00). Optimalizovaná metoda EMMA byla nakonec srovnána s principiálně odlišnou metodou míchání - příčnou difuzí v laminárním toku - a ukázala se také vhodnou pro analýzu lidské plazmy.
Návaznosti
| GBP206/12/G014, projekt VaV |
| ||
| MUNI/A/1278/2016, interní kód MU |
|