MACHÁLKOVÁ, Markéta, Antonín BEDNAŘÍK, Barbora PAVLATOVSKÁ, Jarmila NAVRÁTILOVÁ, Jan ŠMARDA a Jan PREISLER. Testování homogenity sublimované matrice na kvazi-homogenních tkáních pomocí MALDI zobrazovací hmotnostní spektrometrie. In 20. Škola hmotnostní spektrometrie. 2019. ISBN 978-80-88195-14-6.
Další formáty:   BibTeX LaTeX RIS
Základní údaje
Originální název Testování homogenity sublimované matrice na kvazi-homogenních tkáních pomocí MALDI zobrazovací hmotnostní spektrometrie
Název česky Testování homogenity sublimované matrice na kvazi-homogenních tkáních pomocí MALDI zobrazovací hmotnostní spektrometrie
Název anglicky Testing DHB matrix sublimation homogeneity on quasi-homogeneous tissues by MALDI MSI
Autoři MACHÁLKOVÁ, Markéta, Antonín BEDNAŘÍK, Barbora PAVLATOVSKÁ, Jarmila NAVRÁTILOVÁ, Jan ŠMARDA a Jan PREISLER.
Vydání 20. Škola hmotnostní spektrometrie, 2019.
Další údaje
Originální jazyk čeština
Typ výsledku Konferenční abstrakt
Stát vydavatele Česká republika
Utajení není předmětem státního či obchodního tajemství
Organizační jednotka Přírodovědecká fakulta
ISBN 978-80-88195-14-6
Klíčová slova česky MALDI MSI, sublimace, homogenita, DHB matrice, kvazihomogenní tkáň, perifosin
Klíčová slova anglicky MALDI MSI, sublimation, homogeneity, DHB matrix, quasi-homogeneous tissue, perifosine
Změnil Změnil: prof. Mgr. Jan Preisler, Ph.D., učo 45329. Změněno: 18. 10. 2019 16:02.
Anotace
Zobrazovací hmotnostní spektrometrie s laserovou desorpcí a ionizací za účasti matrice (MALDI) je analytická metoda umožňující detekovat distribuci velkého množství analytů v planárním vzorku (řezu buněk, tkáně, orgánu). Jako matrice vystupuje většinou malá organická molekula, která se vzorkem krystalizuje. Matrice musí pokrývat celý analyzovaný vzorek tak, aby nedocházelo k lokálnímu zvyšování/snižování signálu analytu v důsledku větší/menší vrstvy nanesené matrice. Matrici je možné rovnoměrně na řez nanést mokrou nebo suchou cestou. Pro suché nanášení je vhodná metoda sublimace, kdy se tvoří drobné krystalky matrice, následně umožňující zobrazovat analyty s vysokým prostorovým rozlišením. Nevýhodou této metody ale může být zhoršená extrakce některých analytů. Cílem našeho experimentu bylo zjistit homogenitu sublimované DHB matrice přes celé vodivé mikroskopické sklíčko. Pouze v případě stejné vrstvy matrice je totiž teoreticky možné kvantitativně porovnávat množství léčiva v několika velmi podobných tkáňových řezech bez nutnosti normalizace. Homogenita nanesení matrice byla testována na kvazi-homogenních tkáních kolorektálního karcinomu ošetřených studovaným léčivem. Kvazi-homogenní tkáně byly vytvořeny z 2D rakovinných buněk indukovaných perifosinem. Buňky byly promyty a stočeny do mikrozkumavky a pelet byl po zmrazení nakrájen na tenké řezy. Pro nanesení matrice byla využita komerčně dostupná sublimační aparatura, která byla v průběhu experimentů modifikována pro zlepšení homogenity nanesení. Žádná z modifikací ovšem bohužel nezajistila zcela uniformní pokrytí celé plochy sklíčka, na které byly umístěny jednotlivé kvazi-homogenní tkáňové řezy. Proto, pro porovnání hladin léčiva v několika tkáňových řezech, např. u časově indukovaných 3D buněčných agregátů (sferoidů), je potřeba množství léčiva v řezu normalizovat na zvolený externí nebo interní standard.
Návaznosti
LQ1601, projekt VaVNázev: CEITEC 2020 (Akronym: CEITEC2020)
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, CEITEC 2020
MUNI/A/1359/2018, interní kód MUNázev: Vývoj metod a instrumentace pro analýzu biologicky významných látek 2019
Investor: Masarykova univerzita, Vývoj metod a instrumentace pro analýzu biologicky významných látek 2019, DO R. 2020_Kategorie A - Specifický výzkum - Studentské výzkumné projekty
MUNI/G/0974/2016, interní kód MUNázev: Optimalizace cílené terapie kolorektálního karcinomu ovlivňováním účinnosti penetrace a cytotoxicity regulátorů buněčných signalizací
Investor: Masarykova univerzita, Optimalizace cílené terapie kolorektálního karcinomu ovlivňováním účinnosti penetrace a cytotoxicity regulátorů buněčných signalizací, INTERDISCIPLINARY - Mezioborové výzkumné projekty
VytisknoutZobrazeno: 7. 5. 2024 06:53