2022
Detekce proteinových biomarkerů pomocí lateral flow testů s foton-upkonverzními nanočásticemi
MACHÁČOVÁ, Eliška a Zdeněk FARKAZákladní údaje
Originální název
Detekce proteinových biomarkerů pomocí lateral flow testů s foton-upkonverzními nanočásticemi
Název anglicky
Detection of protein biomarkers using lateral flow tests with photon-upconversion nanoparticles
Autoři
MACHÁČOVÁ, Eliška (203 Česká republika, garant, domácí) a Zdeněk FARKA (203 Česká republika, domácí)
Vydání
Praha, Czech Chem. Soc. Symp. Ser. 20, 335–339 (2022), od s. 335-339, 5 s. 2022
Nakladatel
Czech Chemical Society Symposium Series
Další údaje
Jazyk
čeština
Typ výsledku
Stať ve sborníku
Obor
10406 Analytical chemistry
Stát vydavatele
Česká republika
Utajení
není předmětem státního či obchodního tajemství
Forma vydání
elektronická verze "online"
Odkazy
Kód RIV
RIV/00216224:14310/22:00129216
Organizační jednotka
Přírodovědecká fakulta
ISSN
Klíčová slova česky
foton-upkonverzní nanočástice; UCNP; imunostanovení; ELISA; ULISA; lidský sérový albumin; HSA; diagnostický proužek; LFIA
Klíčová slova anglicky
photon-upconversion nanoparticle; UCNP; immunoassay; human serum albumin; HSA; diagnostic strip; LFIA
Změněno: 10. 11. 2022 15:32, Mgr. Eliška Macháčová
V originále
S využitím konjugátů UCNPs se podařilo optimalizovat LFIA stanovení pro detekci HSA. Pro analýzu byla využita specifická anti-HSA protilátka a kontrolní anti-myší protilátka. Jako vhodný pufr pro imobilizaci protilátek byl zvolen acetátový pufr s přídavkem 1% methanolu. Pro výsledné vyhodnocení analýzy bylo potřeba zajistit vhodné podmínky pro inkubaci a uvolnění konjugátu UCNPs ze skleněné membrány, zde se jako nejlepší kombinace ukázalo využití skleněné membrány ST17 a Tris pufru s 5% sacharosou. Volba odlišné nitrocelulosové membrány pak měla na vývoj imunostanovení relativně malý vliv, nejvýhodnější se ukázalo použití membrány 120 HP Plus Thick. S optimalizovanými podmínkami LFIA došlo ke snížení pozadí analýzy a dostatečné odezvě signálu, což ukazuje na potenciál využití UCNPs jako alternativní značky v LFIA stanoveních. Dále byla úspěšně demonstrována schopnost detegovat HSA, a proto bude dalším krokem analýza reálných vzorků obsahujících různé koncentrace HSA, aby byl ověřen praktický potenciál metody pro klinické účely.
Anglicky
Rapid and sensitive detection of clinically important analytes is crucial for early disease diagnosis and initiation of treatment. Immunochemical assays are widely used to determine the presence and concentration of analytes in various complex media due to their high specificity provided by antibodies. Recently, lateral flow immunoassays (LFIAs) are becoming one of the most popular forms of immunochemical assays. LFIAs are test strips based on nitrocellulose membranes, and their most significant advantage is that there is no need for laboratory equipment to perform the assay enabling their use for point-of-care testing. Most LFIAs are based on gold nanoparticles; however, they often limit the resulting sensitivity of LFIAs. Our work focused on photon-upconversion nanoparticles (UCNPs) as a sensitive alternative label. UCNPs are lanthanide-based nanocrystals exhibiting anti-Stokes luminescence (excitation by the NIR laser and detection in the Vis region), which allows detection without optical background interference. We have developed an LFIA assay for human serum albumin (HSA) with UCNPs as a label. Using a specific anti-HSA antibody and a control anti-mouse antibody, various LFIA parameters were optimized. The immobilization of antibodies was done using acetate buffer with 1% methanol, glass membrane ST17 was used as a conjugate pad, and Tris buffer with 5% sucrose was used to stabilize the particles within the conjugate pad. The choice of a different nitrocellulose membrane had a relatively small effect on assay performance; the best results were achieved with membrane 120 HP Plus Thick. Our work has successfully demonstrated the potential of using UCNPs as sensitive labels in LFIA tests.
Návaznosti
| GA21-03156S, projekt VaV |
|