2002
Stanovení glutathion-S-transferasy na pevných elektrodách
BRÁZDOVÁ, Marie, René KIZEK, Jan VACEK a Libuše TRNKOVÁZákladní údaje
Originální název
Stanovení glutathion-S-transferasy na pevných elektrodách
Název anglicky
Determination of glutathion-S-transferase on solid electrodes
Autoři
BRÁZDOVÁ, Marie (203 Česká republika), René KIZEK (203 Česká republika), Jan VACEK (203 Česká republika) a Libuše TRNKOVÁ (203 Česká republika, garant)
Vydání
1. vyd., 2002. Brno, 2002, Sborník abstrakt III. pracovního setkání fyzikálních chemiků a elektrochemiků v Brně, s. 14-14, 2002
Nakladatel
Masarykova univerzita v Brně
Další údaje
Jazyk
čeština
Typ výsledku
Stať ve sborníku
Obor
10405 Electrochemistry
Stát vydavatele
Česká republika
Utajení
není předmětem státního či obchodního tajemství
Kód RIV
RIV/00216224:14310/02:00005603
Organizační jednotka
Přírodovědecká fakulta
ISBN
80-210-2776-2
Klíčová slova anglicky
glutathion-S-transferasa;pevné elektrody;adsorptivní přenosová diferenční pulzní voltametrie;katalytické procesy bílkovin
Změněno: 31. 5. 2003 14:40, RNDr. JUDr. Vladimír Šmíd, CSc.
V originále
Glutathion-S-transferasy (EC 2.5.1.18 - GST) tvoří rodinu enzymů, které katalyzují připojení tripeptidu glutathionu (g-glutamylcysteinyl-glycin) k endogenním a exogenním substrátům. Cílem práce je nalézt biosenzor v podobě pevné elektrody, který by byl schopen GST detekovat v moči.GST (25 kDa) protein pocházející z Schizosotoma japonicum byl purifikován afinitní chromatografií (FPLC Pharmacia)a elektrochemicky byl nalyzován na přístroji AUTOLAB ve spojení s VA-Stand 663. Elektrodový systém se skládal z pracovní elektrody - pastová uhlíková (poměr uhlík:minerální olej; 70:30 (w%), PGE (pyrolytická grafitová elektroda) a nebo HMDE (visící rtuťová kapková elektroda, z referenční elektrody Ag/AgCl/3M KCl a pomocné platinové elektrody. Při adsorptivní přenosové diferenční pulsní voltametrii (AdT DPV) se GST adsorbovalo na pracovní elektrodě ze 6 mL vzorku. Voltametrická měření byla provedena v prostředí acetátového pufru (pH 5.0). Uhlíkové elektrody poskytují velmi dobře reprodukovatelné oxidační signály tryptofanu a tyrosinu, na HMDE byly pozorovány katalytické signály GST (pík H nebo signál v Brdičkově reakci). Koncentrační závislost GST byla v rozsahu 5 mg/mL - 100 mg/mL vykazovala lineární průběh.
Anglicky
Glutathion-S-transferase (EC 2.5.1.18 - GST) belongs to the family of enzymes catalysing the connection of tripeptide of glutathione (g-glutamylcysteinyl-glycine) with endogene and exogene substrates. The aim of this paper was to find biosenzor detecting GST in urea. GST (25 kDa) protein from Schizosotoma japonica was purified by chromatography (FPLC Pharmacia ) and electrochemically analyzed on AUTOLAB. Used electrode system was: the working electrode - paste carbon or pyrolytic graphite electrodes (PGE), or hanging mercury dropping electrode (HMDE; the reference elektrode was Ag/AgCl/3M KCl; the auxiliery electrode was platinum wire. In adsorptive transfer differential pulse voltammetry (AdT DPV) GST was adsorbed at the working electrode from 6 mL of the sample. Carbon and graphite electrodes give good reproducible oxidation signals of tryptofane a tyrosine. On HMDE catalytic GST signals were observed (peak H or Brdicka signal). In the range of 5 mg/mL - 100 mg/mL the linear concentration dependence of GST was measured.
Návaznosti
| GV204/97/K084, projekt VaV |
| ||
| MSM 143100011, záměr |
|