Další formáty:
BibTeX
LaTeX
RIS
@inproceedings{632078,
author = {Konečný, Jiří and Glatz, Zdeněk},
address = {Brno},
booktitle = {X. pracovní setkání biochemiků a molekulárních biologů.},
keywords = {CE; MEKC; cytochrome P450 2C9; metabolism},
language = {cze},
location = {Brno},
isbn = {80-210-3942-6},
pages = {71-71},
publisher = {Masarykova univerzita},
title = {Stanovení aktivity isoformy CYP450 2C9 pomocí micelární elektrokinetické chromatografie},
year = {2006}
}
TY - JOUR
ID - 632078
AU - Konečný, Jiří - Glatz, Zdeněk
PY - 2006
TI - Stanovení aktivity isoformy CYP450 2C9 pomocí micelární elektrokinetické chromatografie
PB - Masarykova univerzita
CY - Brno
SN - 8021039426
KW - CE
KW - MEKC
KW - cytochrome P450 2C9
KW - metabolism
N2 - Nejčastěji je v dnešní době ke studiu metabolismu cizorodých látek používána kapalinová chromatografie (HPLC) ve spojení s UV (LC-UV) a fluorescenční (LC-fluorescence) detekcí, ojediněle pak ve spojení s hmotnostní spektrometrií (LC-MS). Tyto metody jsou však náročnější na objemy chemikálií a vzorků nutných k úspěšnému provedení analýzy. Výhodou kapilární elektroforézy (CE) je její časová nenáročnost a hlavně i malá spotřeba vzorku, která je především důležitá v případě enzymových preparátů, substrátů, případně inhibitorů. Automatizace všech kroků vlastního stanovení navíc eliminuje experimentální chyby. Micelární elektrokinetická chromatografie (MEKC) patří mezi nejpoužívanější módy CE. Její velkou výhodou oproti HPLC je snadnější příprava vzorků nevyžaduje předpřípravu biologických vzorků jako je např. extrakce. Cytochrom P450 je v současné době označení pro rozsáhlou skupinu hemoproteinů, přičemž tyto izoformy zřejmě pochází ze společného proteinu, ze kterého se vytvořily během biologické evoluce. V současnosti je známo více než 270 různých genových rodin cytochromu P450, z nichž 18 je prokázáno u savců, u nichž se podílejí na biosyntéze a metabolismu sterolů a steroidních hormonů, na metabolismu různých lipidických biofaktorů včetně necyklických uhlovodíků - eikosanů, vitamínu D3 a retinoidů. Hlavní funkcí, kterou plní cytochromy P450 v organismu, je oxidativní metabolismus cizorodých látek. Pro sledování metabolické aktivity isoformy 2C9 cytochromu P450 se využívají tolbutamid a diclofenac a jejich hydroxylace na 4-hydroxy- tolbutamid resp. 4-hydroxydiclofenac.V návaznosti na tuto skutečnost byla vypracovaná metoda pro stanovení aktivity mikrosomálního cytochromu P450 a jeho isoformy 2C9 pomocí MEKC v off-line módu. Vypracovaná metoda je použitelná pro stanovení obou substrátů a jejich metabolitů pouze s rozdílem ve výběru vlnové délky při detekci. Její nezanedbatelnou výhodou oproti klasickému stanovení pomocí HPLC je odstranění extrakčního kroku z přípravy vzorku pro analýzu.
ER -
KONEČNÝ, Jiří a Zdeněk GLATZ. Stanovení aktivity isoformy CYP450 2C9 pomocí micelární elektrokinetické chromatografie. In \textit{X. pracovní setkání biochemiků a molekulárních biologů.}. Brno: Masarykova univerzita, 2006, s.~71. ISBN~80-210-3942-6.
|
