The diagnosis of Fusarium culmorum by polyclonal antibodies - preparation and character of antigens ans antibodies.

KRÁTKÁ, J., B. KYNĚROVÁ, A. ZEMANOVÁ a S. SÝKOROVÁ. The diagnosis of Fusarium culmorum by polyclonal antibodies - preparation and character of antigens ans antibodies. Ochrana rostlin. Praha: Ústav zemědělských a potravinářských inf, 1997, roč. 33, č. 2, s. 89-102, 10 s. ISSN 1212-2580.

Základní údaje

• Originální název: The diagnosis of Fusarium culmorum by polyclonal antibodies - preparation and character of antigens ans antibodies.
• Název česky: Diagnostika Fusarium culmorum pomocí polyklonálních protilátek - příprava a vlastnosti antigenů a protilátek.
• Autoři: KRÁTKÁ, J., B. KYNĚROVÁ, A. ZEMANOVÁ a S. SÝKOROVÁ.
• Vydání: Ochrana rostlin, Praha, Ústav zemědělských a potravinářských inf, 1997, 1212-2580.

Další údaje

• Typ výsledku: Článek v odborném periodiku
• Utajení: není předmětem státního či obchodního tajemství
• Organizační jednotka: Přírodovědecká fakulta
• Klíčová slova anglicky: Fusarium culmorum, media, isolates, morphological and physiological character, antigen, proteins, polyclonal antibodies, sensitivity, specificity, cross-reactions

Anotace

Eighteen monospore Fusarium culmorum (FCu) isolates with different pathogenicity were cultivated on five liquid media. Czapek Dox and Minimal medium were suitable media. The morphological and physiological characteristics were determined (chlamydospore and conidia production, conidia dimension, character of mycelia, colour of media, growth dynamics of mycelium and weight of dry mycelial mats). The composition of media influenced morphological and physiological characters of isolates. Pathogenicity was not correlated with character of isolates. Antigens were prepared by extraction of proteins from mycelial mats in a special buffer, then purified by centrifugation and ultracentrifugation of supernatant. The composition of media influenced quantity and quality of proteins of antigens. The pathogenicity of FCu isolates was not correlated with protein content of antigens. Specificity and sensitivity of polyclonal antibodies after immunization of rabbits with FCu antigens were studied. Different reactions of antigens of FCu isolates were not found. Anti-FCu IgG reacted with antigens of another species of Fusarium (oxysporum, solani, equisetum, nivale, sambucinum, poae, avenaceum), the differences were quantitative. Cross-reactions of anti-FCu IgG with antigens of Pseudocercosporella herpotrichoides, Gaeumannomyces graminis, Rhizoctonia solani, Trichoderma viridae (pathogenic isolates of wheat) were not observed. Reaction of antisera and IgG with antigens were evaluated by agar double diffusion and ELISA.

Anotace česky

Osmnáct monosporových izolátů Fusarium culmorum (FCu) s rozdílnou patogenitou bylo kultivováno na pěti tekutých mediích. Nejvhodnější pro další využití byly určeny média Czapek Dox a Minimální medium. Bylo zjíštěno, že media ovlivňují jak morfologické tak fyziologické vlastnosti jednotlivých izolátů. Sledované vlastnosti příp. jejich změny nejsou v korelaci s patogenitou sledovaných izolátů FCu. Antigeny byly připraveny z myceliální masy extrakcí ve speciálním pufru a purifikovány centrifugací a ultracentrifugací supernatantu. Tekutá media ovlivnila kvantitu i kvalitu proteinů antigenů. Bylo zjištěno, že obsah a složení proteinů, příp. jejich změny nejsou v korelaci s patogenitou izolátů FCu. Z krve imunizovaných králíků antigenem FCu byly získány polyklonální protilátky a byla sledována jejich citlivost a specifičnost. Nebyly zjištěny rozdílné reakce mezi jednotlivými izoláty FCu. Anti-FCu IgG reagovalo s antigeny dalších druhů r. Fusarium (oxysporum, solani, equisetum, nivale, sambucinum, poae, avenaceum), rozdíly byly kvantitativní. Nebyly zjištěny křížové reakce s dalšími patogeny izolovanými z pšenice (Rhizoctonia solani, Gaeumannomyces graminis, pseudocercosporella herpotrichoides, Trichoderma viridae). Reakce antisér a IgG s antigeny byly sledovány pomocí dvojité difúze v agaru a ELISA.