J 2006

Capillary isoelectric focusing of microorganisms in the pH range 2-5 in a dynamically modified FS capillary with UV detection.

HORKÁ, Marie, Filip RŮŽIČKA, Veronika HOLÁ a Karel ŠLAIS

Základní údaje

Originální název

Capillary isoelectric focusing of microorganisms in the pH range 2-5 in a dynamically modified FS capillary with UV detection.

Název česky

Kapilární isoelektrická fokusace mikroorganismů v pH 2-5 v dynamicky modifikované FS kapiláře s UV detekcí

Autoři

HORKÁ, Marie (203 Česká republika), Filip RŮŽIČKA (203 Česká republika, garant), Veronika HOLÁ (203 Česká republika) a Karel ŠLAIS (203 Česká republika)

Vydání

Analytical and Bioanalytical Chemistry, Heidelberg, Springer-Verlag GmbH, 2006, 1618-2642

Další údaje

Jazyk

angličtina

Typ výsledku

Článek v odborném periodiku

Obor

30300 3.3 Health sciences

Stát vydavatele

Německo

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Impakt faktor

Impact factor: 2.591

Kód RIV

RIV/00216224:14110/06:00016448

Organizační jednotka

Lékařská fakulta

UT WoS

000238496100009

Klíčová slova česky

Kapilární izoelelktrická fokusace; mikroorganizmy; Staphylococcus; Candida; Escherichia coli; UV detekce

Klíčová slova anglicky

capillary isoelectric focusing; microorganisms; Staphylococcus; Candida; Escherichia coli; UV detection.

Příznaky

Mezinárodní význam, Recenzováno
Změněno: 25. 6. 2009 09:23, prof. MUDr. Filip Růžička, Ph.D.

Anotace

V originále

The isoelectric points of many microbial cells lie within the pH range spanning from 1.5 to 4.5. In this work, we suggest a CIEF method for the separation of cells according to their isoelectric points in the pH range of 2-5. It includes the segmental injection of the sample pulse composed of the segment of the selected simple ampholytes, the segment of the bioanalytes and the segment of carrier ampholytes into fused silica capillaries dynamically modified by poly(ethylene glycole). This polymer dissolved in the catholyte, in the anolyte and in the injected sample pulse was used for a prevention of the bioanalyte adsorption on the capillary surface and for the reduction of the electroosmotic flow. Between each focusing run, the capillaries were washed with the mixture of acetone/ethanol to achieve the reproducible and efficient CIEF. In order to trace of pH gradients, low-molecular-mass pI markers were used. The mixed cultures of microorganisms, Escherichia coli CCM 3954, Candida albicans CCM 8180, Candida parapsilosis, Candida krusei, Candida glabrata, Candida tropicalis, CCM 8223, Proteus vulgaris, Klebsiela pneumoniae, Staphylococcus aureus CCM 3953, Streptococcus agalactiae CCM 6187, Enterococcus faecalis CCM 4224 and Staphylococcus epidermidis CCM 4418, were focused and separated by the CIEF method suggested here. This CIEF method enables the separation and detection of the microbes from the mixed cultures within several minutes. The minimum detectable number of microbial cells was less than 10(3).

Česky

CIEF v kyselém gradientu pH 2-5 umožňuje separaci a identifikaci mikrobů i ze směsných kultur.

Návaznosti

IAA4031302, projekt VaV
Název: Využití rychlé elektroforetické separace s velmi citlivou fluorimetrickou detekcí pro identifikaci mikroorganismů
Investor: Akademie věd ČR, Využití rychlé elektroforetické separace s velmi citlivou fluorimetrickou detekcí pro identifikaci mikroorganismů