2006
Využití nového in vitro modelu ke studiu vlivů vybraných environmentálních kontaminantů na retinoidní signálování
BENÍŠEK, Martin, Jaroslav JANOŠEK, Jiří NOVÁK a Klára HILSCHEROVÁZákladní údaje
Originální název
Využití nového in vitro modelu ke studiu vlivů vybraných environmentálních kontaminantů na retinoidní signálování
Název česky
Využití nového in vitro modelu ke studiu vlivů vybraných environmentálních kontaminantů na retinoidní signálování
Název anglicky
New in vitro model as a tool for studying interference of selected environmental contaminants with the signaling of retinoids
Autoři
BENÍŠEK, Martin (203 Česká republika), Jaroslav JANOŠEK (203 Česká republika), Jiří NOVÁK (203 Česká republika) a Klára HILSCHEROVÁ (203 Česká republika, garant)
Vydání
Bratislava, Slovenská republika, Študentská vedecká konferencia, 1.zväzok, biologická a environmentálna sekcia, od s. 200-2002, 3 s. 2006
Nakladatel
Univerzita Komenského v Bratislavě
Další údaje
Jazyk
čeština
Typ výsledku
Stať ve sborníku
Obor
30304 Public and environmental health
Stát vydavatele
Slovensko
Utajení
není předmětem státního či obchodního tajemství
Kód RIV
RIV/00216224:14310/06:00016465
Organizační jednotka
Přírodovědecká fakulta
ISBN
80-88870-58-5
Klíčová slova anglicky
retinoid signaling;N-PAHs; phthalates
Štítky
Příznaky
Mezinárodní význam
Změněno: 26. 6. 2007 17:30, Mgr. Martin Beníšek, Ph.D.
V originále
Řada látek znečišťujících životní prostředí vykazuje vzhledem k nízkým environmentálním koncentracím především chronické účinky. K těm patří především karcinogenita, imunotoxicita nebo endokrinní disrupce ale také embryotoxicita a teratogenita. Velmi významnou roli v procesech embryotoxicity a teratogenity hrají především retinoidní receptory (RAR, RXR), jejichž přirozenými ligandy jsou retinoidy. [4] Retinoidy jsou deriváty vitaminu A, které mají důležitou roli při vývoji různých tkání obratlovců a to díky vlivu na buněčnou proliferaci, diferenciaci a apoptózu[7]. Patří mezi ně například retinol, kyselina retinová (ATRA) a dále estery kyseliny retinové. Jako odpověď na navázání retinoidů podstoupí RAR/RXR receptory (vyskytující se v buňce převážně ve formě dimerů) konformační změny [1]. Následná iniciace transkripce specifických cílových genů má za následek nejrůznější účinky na úrovni molekulární, buněčné i organismální[3, 5]. O možném narušení těchto drah xenobiotiky je dosud známo jen velmi málo a existuje také pouze omezený počet in vitro metod, které by dovolovaly studovat tyto mechanismy. Na našem pracovišti jsme vyvinuli zcela novou jednoduchou metodu, umožnující screening anti/retinoidních efektů širokého spektra látek. V této metodě jsme použili buněčnou linii P19/A15, transfekovanou genem exprimujícím luciferázu. Tato exprese je řízena responsivními elementy kyseliny retinové. Tato linie je odvozená z linie P19, která se často používá pro in vitro experimenty v embryologii [7]. Po vazbě ligandu na receptor a následné aktivaci transkripce dochází k expresi luciferázy. Po reakci luciferázy se substrátem dochází k luminiscenci, která je stanovena na luminometru. V naší práci jsme prostudovali pomocí této nové metody vliv vybraných environmentálních kontaminantů, jako jsou některé ftaláty, dusíkaté heterocyklické aromatické uhlovodíky (N-PAH) a polycyklické aromatické uhlovodíky (PAH).Tyto látky byly vybrány zvláště pro jejich široké rozšíření v životním prostředí a malé znalosti o jejich vlivu na retinoidní signálování. Kromě výše zmíněné metody s buněčnou linií P19/A15 u buněk nediferencovaných jsme u některých látek provedli luminiscenční test na buňkách diferencovaných v buňky primitivního endodermu.
Anglicky
Řada látek znečišťujících životní prostředí vykazuje vzhledem k nízkým environmentálním koncentracím především chronické účinky. K těm patří především karcinogenita, imunotoxicita nebo endokrinní disrupce ale také embryotoxicita a teratogenita. Velmi významnou roli v procesech embryotoxicity a teratogenity hrají především retinoidní receptory (RAR, RXR), jejichž přirozenými ligandy jsou retinoidy. [4] Retinoidy jsou deriváty vitaminu A, které mají důležitou roli při vývoji různých tkání obratlovců a to díky vlivu na buněčnou proliferaci, diferenciaci a apoptózu[7]. Patří mezi ně například retinol, kyselina retinová (ATRA) a dále estery kyseliny retinové. Jako odpověď na navázání retinoidů podstoupí RAR/RXR receptory (vyskytující se v buňce převážně ve formě dimerů) konformační změny [1]. Následná iniciace transkripce specifických cílových genů má za následek nejrůznější účinky na úrovni molekulární, buněčné i organismální[3, 5]. O možném narušení těchto drah xenobiotiky je dosud známo jen velmi málo a existuje také pouze omezený počet in vitro metod, které by dovolovaly studovat tyto mechanismy. Na našem pracovišti jsme vyvinuli zcela novou jednoduchou metodu, umožnující screening anti/retinoidních efektů širokého spektra látek. V této metodě jsme použili buněčnou linii P19/A15, transfekovanou genem exprimujícím luciferázu. Tato exprese je řízena responsivními elementy kyseliny retinové. Tato linie je odvozená z linie P19, která se často používá pro in vitro experimenty v embryologii [7]. Po vazbě ligandu na receptor a následné aktivaci transkripce dochází k expresi luciferázy. Po reakci luciferázy se substrátem dochází k luminiscenci, která je stanovena na luminometru. V naší práci jsme prostudovali pomocí této nové metody vliv vybraných environmentálních kontaminantů, jako jsou některé ftaláty, dusíkaté heterocyklické aromatické uhlovodíky (N-PAH) a polycyklické aromatické uhlovodíky (PAH).Tyto látky byly vybrány zvláště pro jejich široké rozšíření v životním prostředí a malé znalosti o jejich vlivu na retinoidní signálování. Kromě výše zmíněné metody s buněčnou linií P19/A15 u buněk nediferencovaných jsme u některých látek provedli luminiscenční test na buňkách diferencovaných v buňky primitivního endodermu.
Návaznosti
| GP525/05/P160, projekt VaV |
|