a 2007

METALO + PROTEIN = GE + LA + ICP + MS

HAVLIŠ, Jan and Hana OVADOVÁ

Basic information

Original name

METALO + PROTEIN = GE + LA + ICP + MS

Name in Czech

METALO + PROTEIN = GE + LA + ICP + MS

Name (in English)

METALO + PROTEIN = GE + LA + ICP + MS

Authors

HAVLIŠ, Jan (203 Czech Republic, guarantor) and Hana OVADOVÁ (203 Czech Republic)

Edition

13. Spektrometrická konference - sborník, 2007

Other information

Language

Czech

Type of outcome

Konferenční abstrakt

Field of Study

10406 Analytical chemistry

Country of publisher

Czech Republic

Confidentiality degree

není předmětem státního či obchodního tajemství

RIV identification code

RIV/00216224:14310/07:00020361

Organization unit

Faculty of Science

Keywords in English

metalloprotein; speciation; gel electrophoresis; laser ablation; ICP MS

Tags

International impact
Změněno: 9/4/2010 13:42, doc. Mgr. Jan Havliš, Dr.

Abstract

V originále

Gelová elektroforéza se jako selektivní složka velmi dobře kombinuje s LA-ICP-MS jako citlivou složkou a jinými hmotnostně spektrometrickými technikami v rámci složky strukturní. Byla provedena nativní a denaturující gelová elektroforéza modelového vzorku BSA, který byl saturován ionty Cu(II+), Co(II+). Pro zakoncentrování vzorku bylo použito napětí 100 V po dobu 10 minut a separace trvala 30 minut při 200 V. Gel byl sušen pomocí sušičky gelu (model GD5040). Pro laserovou ablaci separovaných metaloproteinů byl použit nanosekundový Nd:YAG laser (New Wave, USA) pracující při vlnové délce 213 nm s délkou pulzu 4,2 ns a frekvencí 20 Hz. Vzorek vysušeného gelu byl umístěn do ablační cely o objemu 10 cm-3. Nejnižší hodnoty RSD intenzit signálu odpovídaly těm získaným po LA gelu, který byl vizualizován stříbrem. Při optimalizaci podmínek laserové ablace na gelu nasyceném ionty Co(II+) o koncentraci 10-4 mol.l-1 bylo zjištěno vhodné použití hodnot hustoty zářivého výkonu v rozmezí 0,2 GW.cm-2 až 2 GW.cm-2.

In English

Gel electrophoresis (GE), a selective component, is combined effectively with LA-ICP-MS as a sensitive component, and with other mass spectrometric techniques as structural components of metalloprotein associated approach. Native and denaturating GE was done for model sample of BSA saturated with Cu(II+), Co(II+) ions. Sample was preconcetrated for 10 mins at 100 V, separation took 30 mins at 200 V. Gel was then dried in gel drier (model GD5040). A nanosecond Nd:YAG laser (New Wave, USA) working at 213 nm with pulse length 4.2 ns and frequency 20 Hz was used for laser ablation of separated metalloproteins. Dried gel sample was in 10cm-3 ablation cell. Lowest RSD values for signal intensity were obtained with gels stained with silver. During laser ablation optimisation of gel saturated with Co(II+) ions it was found that optimal densities of irradiation output lie between 0.2 GW.cm-2 and 2 GW.cm-2.

Links

GA203/07/1391, research and development project
Name: Vývoj nových metod pro charakterizaci metaloproteinů
Investor: Czech Science Foundation, Development of new methods for metalloprotein characterisation
MSM0021622413, plan (intention)
Name: Proteiny v metabolismu a při interakci organismů s prostředím
Investor: Ministry of Education, Youth and Sports of the CR, Proteins in metabolism and interaction of organisms with the environment