MOLEKULEKULÁRNĚ-GENETICKÁ ANALÝZA KONGENITÁLNÍ ADRENÁLNÍ
HYPERPLÁSIE (DEFICITU 21-HYDROXYLÁSY)

k 2007

MOLEKULEKULÁRNĚ-GENETICKÁ ANALÝZA KONGENITÁLNÍ ADRENÁLNÍ HYPERPLÁSIE (DEFICITU 21-HYDROXYLÁSY)

HRABINCOVÁ, E.; Z. VYCHODILOVÁ a L. KOZÁK

Základní údaje

Originální název

MOLEKULEKULÁRNĚ-GENETICKÁ ANALÝZA KONGENITÁLNÍ ADRENÁLNÍ HYPERPLÁSIE (DEFICITU 21-HYDROXYLÁSY)

Název anglicky

Molecular-genetic analysis of Congenital adrenal hyperplasia

Autoři

HRABINCOVÁ, E.; Z. VYCHODILOVÁ a L. KOZÁK

Vydání

XXX: Endokrinologické dny, 2007

Další údaje

Jazyk

čeština

Typ výsledku

Prezentace na konferencích

Obor

Genetika a molekulární biologie

Stát vydavatele

Česká republika

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Označené pro přenos do RIV

Organizační jednotka

Přírodovědecká fakulta

Klíčová slova anglicky

Congenital adrenal hyperplasia (CAH); MLPA; CYP21 gene

Štítky

Congenital adrenal hyperplasia (CAH), CYP21 gene, MLPA

Změněno: 28. 1. 2008 15:19, doc. RNDr. Lenka Fajkusová, CSc.

Anotace

V originále

Kongenitální adrenální hyperplásie (CAH) je autosomálně recesivní onemocnění, jehož příčinou ve více než 90% je defekt enzymu 21-hydroxylázy, kódované genem CYP21. Výsledkem je nedostatek glukokortikoidního hormonu kortizolu a mineralokortikoidního hormonu aldosteronu, zvýšení sekrece adrenokortikotropního hormonu (ACTH), 17-a-hydroxyprogesteronu (17-OHP) a nadbytek testosteronu. CYP21 gen leží na krátkém raménku šestého chromozómu (6p21.3) v okolí genů kódujících proteiny HLA systému. V těsné blízkosti CYP21 genu leží jeho vysoce homologní pseudogen (CYP21P). V naší populaci tvoří asi 60% zjištěných poruch v CYP21 genu bodové mutace. Většina bodových mutací pochází z pseudogenu a jsou výsledkem genové rekombinace mezi CYP21 genem a CYP21P pseudogenem. Přibližně 30% dosud identifikovaných mutantních alel jsou nefunkční chimerické CYP21P/CYP21 geny vzniklé nerovnoměrným crossing-overem mezi genem a pseudogenem během meiózy. Vzhledem k přítomnosti CYP21P pseudogenu v blízkosti CYP21 genu je DNA diagnostika CAH velmi náročná. Pro DNA diagnostiku CAH jsme zavedli polymerázovou řetězovou reakci (PCR), která umožňuje specifickou amplifikaci CYP21 genu. Následnou sekundární PCR pak stanovíme deset známých mutací: p.P30L, c.290-13A/C>G, c.329-336delGAGACTAC, p.I172N, klastr E6 (p.I236N+p.V237E+p.M239K), p.V281L, p.Q318X, p.R356W, c.920-921insT, chimérní CYP21P/CYP21 gen. Metodou PCR se následně provede důkaz delece celého CYP21 genu.V roce 2006 byla do základní DNA diagnostiky zavedena metoda MLPA (Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification). Metoda MLPA slouží k analýze rozsáhlých delecí a duplikací CYP21 genu i celého přilehlého regionu. Dle závažnosti onemocnění rozeznáváme 3 klinické formy CAH. Pro mírnou neklasickou formu s pozdním nástupem (tzv. LO) jsou typické mutace p.P30L a p.V281L. Mutace c.290-13A/C>G a p.I172N jsou charakteristické pro pacienty s prostou virilizující formou (tzv. SV). Ostatní mutace byly nalezeny u pacientů s klasickou formou se solnou poruchou (tzv. SW). Pro správné stanovení genotypu probanda je nutné vyšetření jeho obou rodičů.

Citovat

HRABINCOVÁ, E.; Z. VYCHODILOVÁ a L. KOZÁK. MOLEKULEKULÁRNĚ-GENETICKÁ ANALÝZA KONGENITÁLNÍ ADRENÁLNÍ HYPERPLÁSIE (DEFICITU 21-HYDROXYLÁSY). In XXX: Endokrinologické dny. 2007.

@proceedings{752021,
   author = {Hrabincová, E. and Vychodilová, Z. and Kozák, L.},
   booktitle = {XXX: Endokrinologické dny},
   keywords = {Congenital adrenal hyperplasia (CAH); MLPA; CYP21 gene},
   language = {cze},
   title = {MOLEKULEKULÁRNĚ-GENETICKÁ ANALÝZA KONGENITÁLNÍ ADRENÁLNÍ HYPERPLÁSIE (DEFICITU 21-HYDROXYLÁSY)},
   year = {2007}
}

TY  - CONF
ID  - 752021
AU  - Hrabincová, E. - Vychodilová, Z. - Kozák, L.
PY  - 2007
TI  - MOLEKULEKULÁRNĚ-GENETICKÁ ANALÝZA KONGENITÁLNÍ ADRENÁLNÍ HYPERPLÁSIE (DEFICITU 21-HYDROXYLÁSY)
KW  - Congenital adrenal hyperplasia (CAH)
KW  - MLPA
KW  - CYP21 gene
N2  - Kongenitální adrenální hyperplásie (CAH) je autosomálně recesivní onemocnění, jehož příčinou ve více než 90% je defekt enzymu 21-hydroxylázy, kódované genem CYP21. Výsledkem je nedostatek glukokortikoidního hormonu kortizolu a mineralokortikoidního hormonu aldosteronu, zvýšení sekrece adrenokortikotropního hormonu (ACTH), 17-a-hydroxyprogesteronu (17-OHP) a nadbytek testosteronu. CYP21 gen leží na krátkém raménku šestého chromozómu (6p21.3) v okolí genů kódujících proteiny HLA systému. V těsné blízkosti CYP21 genu leží jeho vysoce homologní pseudogen (CYP21P). V naší populaci tvoří asi 60% zjištěných poruch v CYP21 genu bodové mutace. Většina bodových mutací pochází z pseudogenu a jsou výsledkem genové rekombinace mezi CYP21 genem a CYP21P pseudogenem. Přibližně 30% dosud identifikovaných mutantních alel jsou nefunkční chimerické CYP21P/CYP21 geny vzniklé nerovnoměrným crossing-overem mezi genem a pseudogenem během meiózy. Vzhledem k přítomnosti CYP21P pseudogenu v blízkosti CYP21 genu je DNA diagnostika CAH velmi náročná. Pro DNA diagnostiku CAH jsme zavedli polymerázovou řetězovou reakci (PCR), která umožňuje specifickou amplifikaci CYP21 genu. Následnou sekundární PCR pak stanovíme deset známých mutací: p.P30L, c.290-13A/C>G, c.329-336delGAGACTAC, p.I172N, klastr E6 (p.I236N+p.V237E+p.M239K), p.V281L, p.Q318X, p.R356W, c.920-921insT, chimérní CYP21P/CYP21 gen. Metodou PCR se následně provede důkaz delece celého CYP21 genu.V roce 2006 byla do základní DNA diagnostiky zavedena metoda MLPA (Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification). Metoda MLPA slouží k analýze rozsáhlých delecí a duplikací CYP21 genu i celého přilehlého regionu. Dle závažnosti onemocnění rozeznáváme 3 klinické formy CAH. Pro mírnou neklasickou formu s pozdním nástupem (tzv. LO) jsou typické mutace p.P30L a p.V281L. Mutace c.290-13A/C>G a p.I172N jsou charakteristické pro pacienty s prostou virilizující formou (tzv. SV). Ostatní mutace byly nalezeny u pacientů s klasickou formou se solnou poruchou (tzv. SW). Pro správné stanovení genotypu probanda je nutné vyšetření jeho obou rodičů.
ER  -

HRABINCOVÁ, E.; Z. VYCHODILOVÁ a L. KOZÁK. MOLEKULEKULÁRNĚ-GENETICKÁ ANALÝZA KONGENITÁLNÍ ADRENÁLNÍ HYPERPLÁSIE (DEFICITU 21-HYDROXYLÁSY). In \textit{XXX: Endokrinologické dny}. 2007.

Přehled o publikaci