J 2008

Comparative study of mouse and human feeder cells for human embryonic stem cells

EISELLEOVÁ, Lívia, Iveta PETERKOVÁ, Jakub NERADIL, Iva SLANINOVÁ, Aleš HAMPL et. al.

Základní údaje

Originální název

Comparative study of mouse and human feeder cells for human embryonic stem cells

Název česky

Srovnávací studie myších a lidských podpůrných buněk pro kultivaci lidských embryonálních kmenových buněk

Autoři

EISELLEOVÁ, Lívia (703 Slovensko, garant), Iveta PETERKOVÁ (203 Česká republika), Jakub NERADIL (203 Česká republika), Iva SLANINOVÁ (203 Česká republika), Aleš HAMPL (203 Česká republika) a Petr DVOŘÁK (203 Česká republika)

Vydání

The International journal of developmental biology, Spain, University Of The Basque Country Press, 2008, 0214-6282

Další údaje

Jazyk

angličtina

Typ výsledku

Článek v odborném periodiku

Obor

Genetika a molekulární biologie

Stát vydavatele

Španělsko

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Impakt faktor

Impact factor: 2.359

Kód RIV

RIV/00216224:14110/08:00026133

Organizační jednotka

Lékařská fakulta

UT WoS

000256177000004

Klíčová slova anglicky

hESCs; human embryonic stem cell; growth factor production; undifferentiated growth

Příznaky

Mezinárodní význam
Změněno: 25. 6. 2009 11:29, prof. Ing. Petr Dvořák, CSc.

Anotace

V originále

Various types of feeder cells have been adopted for the culture of human embryonic stem cells (hESCs) to improve their attachment and provide them with stemness-supporting factors. Here, we compared the expression and secretion of four well-established regulators of hESC pluripotency and/or differentiation among five lines of human foreskin fibroblasts and primary mouse embryonic fibroblasts throughout a standard hESC culture procedure. We found that production of TGFbeta1, activin A, and FGF-2 varied considerably among the human-derived feeder cell lines. Low- and high-producing human feeder cells as well as mouse feeder cells were evaluated for their ability to support the undifferentiated growth of hESCs and for the expression of stem cell markers. Our results suggest that the ability of a feeder layer to promote the undifferentiated growth of hESCs is attributable to its characteristic growth factor production.

Česky

Existuje mnoho typů buněk, které používáme jako tzv. "feedrové" (podpůrné) buňky vhodné pro kultivaci lidských embryonálních kmenových buněk (dále jen lidské ES buňky) a jejich funkcí je především zabezpečení ideálních podmínek a faktorů podporujících sebeobnovu a pluripotenci těchto buněk. Buňky podpůrné vrstvy se však liší ve svých schopnostech podporovat růst nediferencovaných lidských ES buněk. V této práci srovnáváme expresi a sekreci čtyř nejznámějších regulátorů pluripotence a/nebo diferenciace u pěti linií lidských fibroblastů a primárních myších embryonálních fibroblastů během standardní kultivace lidských ES buněk. Zjistili jsme, že lidské a myší podpůrné buňky vylučují srovnatelné hladiny TGFbeta1. Myší podpůrné buňky produkují větší množství activinu A než lidské podpůrné buňky. Na druhou stranu FGF-2, který je produkován lidskými podpůrnými buňkami, nebyl detegován v kultivačním médiu z myších fibroblastů. Nedetegovali jsme žádné významné hladiny BMP-4, přestože BMP-4 dimery jsou přítomny u všech typů podpůrných buněk. Produkce růstových faktorů TGFbeta1, activinu A a FGF-2 se u lidských fibroblastů výrazně lišila. Vybrali jsme takové feedrové buňky, které produkovali nejvíc a nejmíň růstových faktorů a hodnotili jsme jejich schopnost podporovat nediferencovaný růst lidských ES buněk. Zjistili jsme, že signifikantně menší proporce lidských ES buněk kultivovaná na lidských podpůrných buňkách exprimovala SSEA3 - jeden z nejvýznamnějších markrů nediferencovaných buněk. Exprese SSEA3 a tím i pluripotence lidských ES buněk můžou být obnoveny přídavkem activinu A. Tyto výsledky naznačují, že schopnost podpůrné vrstvy podporovat nediferencovaný růst lidských ES buněk, je vlastností úzce spojenou s produkcí růstových faktorů.