Vliv antioxidantů na poškození DNA buněčné linie HL-60
chelerythrinem

a 2008

Vliv antioxidantů na poškození DNA buněčné linie HL-60 chelerythrinem

MATEJOVIČOVÁ, Milena, Miroslav DVOŘÁK, Iva SLANINOVÁ, Zdenka SLUNSKÁ, Eva TÁBORSKÁ et. al.

Basic information

Original name

Vliv antioxidantů na poškození DNA buněčné linie HL-60 chelerythrinem

Name in Czech

Vliv antioxidantů na poškození DNA buněčné linie HL-60 chelerythrinem

Name (in English)

Effect of antioxidants on chelerythrine caused DNA damage in HL-60 cell line

Authors

MATEJOVIČOVÁ, Milena, Miroslav DVOŘÁK, Iva SLANINOVÁ, Zdenka SLUNSKÁ and Eva TÁBORSKÁ

Edition

60. sjezd chemických společností, 2008

Other information

Type of outcome

Konferenční abstrakt

Confidentiality degree

není předmětem státního či obchodního tajemství

References:

URL

Organization unit

Faculty of Medicine

Keywords in English

DNA damage, antioxidants, chelerythrine

Abstract

V originále

Chelerythrin (CHE) a sanguinarin (SA) jsou hlavní zástupci kvarterních benzo[c]phenanthridinových rostlinných alkaloidů. CHE a SA způsobují poškození DNA v buněčné kultuře HL-60(1), mechanismy jejich genotoxického působení však mohou být odlišné. Molekula SA, na rozdíl od CHE, interkaluje do struktury DNA, jak bylo prokázáno na různých buněčných liniích(2). Nejnovější data také potvrzují oxidativní poškození DNA pod vlivem SA(3). Cílem práce bylo zjistit, zda jedním z mechanismů genotoxicity CHE může být také oxidativní stres. Buňky HL-60 o hustotě 106/ml byly inkubovány s CHE (3ug ml-1) po dobu 60 min v kultivačním médiu. Při sledování vlivu antioxidantů předcházela 30 min inkubace se zkoumanou látkou. Flavonoid baicalin, kyselina kávová a Trolox měly v kultuře HL-60 protektivní účinek na poškození DNA peroxidem vodíku, které jsme sledovali metodou analýzy komet. Po ukončení kultivace se zkoumanými látkami byly buňky resuspendovány ve fosfátovém pufru s 10 mM EDTA, pH 7,4 a přidány do roztoku agarózy s nízkou teplotou tání. Alikvóty suspenze byly aplikovány na podložní mikroskopická skla. Po ztuhnutí gelu byly imobilizované buňky lyzovány a podrobeny denaturaci v alkalickém roztoku. Po neutralizaci jsme provedli elektroforézu denaturované DNA imobilizovaných buněk v Tris-borátovém pufru, pH 8,4 (15 min za konstantního napětí 1 V cm-1). Po obarvení dusičnanem stříbrným jsme sledovali podíl DNA v ohonu komet, odpovídající poškození s dvouřetězcovými zlomy. Poškození DNA způsobené CHE odpovídalo 63% DNA v ohonu komet. Všechny aplikované antioxidanty snižovaly poškození DNA (Trolox 50 %, baicalin 40 %, kyselina kávová 54 % DNA v ohonu). Na základě těchto údajů je možné předpokládat, že oxidativní stres je jedním z mechanismů, kterým CHE způsobuje poškození DNA v buněčné kultuře HL-60. Tato práce vznikla za podpory grantu GA ČR 525/08/0819. LITERARURA 1. Dvořák M., Matejovičová M., Slaninová I.,Slunská Z., Táborská E.: VI International Comet Assay Workshop, Warszawa, Poland, September 22-24 2005, Abstract. 2. Slaninová I., Slanina J., Táborská E.: Cytometry 71A, 700 (2007). 3. Matkar S.S., Wrischnik L.A., Hellmann-Blumberg U.: Chemico-Biological Interactions 172, 63 (2008).

Citovat

MATEJOVIČOVÁ, Milena, Miroslav DVOŘÁK, Iva SLANINOVÁ, Zdenka SLUNSKÁ and Eva TÁBORSKÁ. Vliv antioxidantů na poškození DNA buněčné linie HL-60 chelerythrinem (Effect of antioxidants on chelerythrine caused DNA damage in HL-60 cell line). In 60. sjezd chemických společností. 2008.

@proceedings{815923,
   author = {Matejovičová, Milena and Dvořák, Miroslav and Slaninová, Iva and Slunská, Zdenka and Táborská, Eva},
   booktitle = {60. sjezd chemických společností},
   keywords = {DNA damage, antioxidants, chelerythrine},
   title = {Vliv antioxidantů na poškození DNA buněčné linie HL-60 chelerythrinem},
   url = {http://www.chemicke-listy.cz/docs/full/2008_08_718-725.pdf},
   year = {2008}
}

TY  - CONF
ID  - 815923
AU  - Matejovičová, Milena - Dvořák, Miroslav - Slaninová, Iva - Slunská, Zdenka - Táborská, Eva
PY  - 2008
TI  - Vliv antioxidantů na poškození DNA buněčné linie HL-60 chelerythrinem
KW  - DNA damage, antioxidants, chelerythrine
UR  - http://www.chemicke-listy.cz/docs/full/2008_08_718-725.pdf
N2  - Chelerythrin (CHE) a sanguinarin (SA) jsou hlavní zástupci kvarterních benzo[c]phenanthridinových rostlinných alkaloidů. CHE a SA způsobují poškození DNA v buněčné kultuře HL-60(1), mechanismy jejich genotoxického působení však mohou být odlišné. Molekula SA, na rozdíl od CHE, interkaluje do struktury DNA, jak bylo prokázáno na různých buněčných liniích(2). Nejnovější data také potvrzují oxidativní poškození DNA pod vlivem SA(3). Cílem práce bylo zjistit, zda jedním z mechanismů genotoxicity CHE může být také oxidativní stres. Buňky HL-60 o hustotě 106/ml byly inkubovány s CHE (3ug ml-1) po dobu 60 min v kultivačním médiu. Při sledování vlivu antioxidantů předcházela 30 min inkubace se zkoumanou látkou. Flavonoid baicalin, kyselina kávová a Trolox měly v kultuře HL-60 protektivní účinek na poškození DNA peroxidem vodíku, které jsme sledovali metodou analýzy komet. Po ukončení kultivace se zkoumanými látkami byly buňky resuspendovány ve fosfátovém pufru s 10 mM EDTA, pH 7,4 a přidány do roztoku agarózy s nízkou teplotou tání. Alikvóty suspenze byly aplikovány na podložní mikroskopická skla. Po ztuhnutí gelu byly imobilizované buňky lyzovány a podrobeny denaturaci v alkalickém roztoku. Po neutralizaci jsme provedli elektroforézu denaturované DNA imobilizovaných buněk v Tris-borátovém pufru, pH 8,4 (15 min za konstantního napětí 1 V cm-1). Po obarvení dusičnanem stříbrným jsme sledovali podíl DNA v ohonu komet, odpovídající poškození s dvouřetězcovými zlomy. Poškození DNA způsobené CHE odpovídalo 63% DNA v ohonu komet. Všechny aplikované antioxidanty snižovaly poškození DNA (Trolox 50 %, baicalin 40 %, kyselina kávová 54 % DNA v ohonu). Na základě těchto údajů je možné předpokládat, že oxidativní stres je jedním z mechanismů, kterým CHE způsobuje poškození DNA v buněčné kultuře HL-60. Tato práce vznikla za podpory grantu GA ČR 525/08/0819. LITERARURA 1. Dvořák M., Matejovičová M., Slaninová I.,Slunská Z., Táborská E.: VI International Comet Assay Workshop, Warszawa, Poland, September 22-24 2005, Abstract. 2. Slaninová I., Slanina J., Táborská E.: Cytometry 71A, 700 (2007). 3. Matkar S.S., Wrischnik L.A., Hellmann-Blumberg U.: Chemico-Biological Interactions 172, 63 (2008).
ER  -

Detailed Information on Publication Record