2006
Identification of chromosomal fusion sites in Arabidopsis mutants using sequential bicolour BAC-FISH
MOKROS, PetrZákladní údaje
Originální název
Identification of chromosomal fusion sites in Arabidopsis mutants using sequential bicolour BAC-FISH
Název česky
Identifikace míst chromozomomálních fůzí u mutantů A. thaliana s použitím sekvenční bicolour BAC-FISH
Autoři
Vydání
Genome, NRC Research Press, 2006
Další údaje
Jazyk
angličtina
Typ výsledku
Článek v odborném periodiku
Obor
Genetika a molekulární biologie
Stát vydavatele
Kanada
Utajení
není předmětem státního či obchodního tajemství
Odkazy
Označené pro přenos do RIV
Ano
Organizační jednotka
Přírodovědecká fakulta
UT WoS
Klíčová slova česky
fůze chromosomů dvoubarevná FISH BAC proby atTERT
Klíčová slova anglicky
Chromosomal fusion bicolor FISH BAC probes atTERT
Příznaky
Mezinárodní význam, Recenzováno
Změněno: 22. 6. 2009 13:31, Mgr. Jan Vrbský, Ph.D.
V originále
Double stranded chromosomal breaks are repaired by homologous recombination or nonhomologous end joining (NHEJ). When broken chromosome ends are fused together by NHEJ, the resulting dicentric chromosomes can be detected as anaphase bridges during the subsequent mitosis. Telomeres in the absence of functional telomerase shorten, became unprotected, and are eventually recognized by the cell repair system as double stranded breaks. As result, chromosomes of Arabidopsis thaliana plants that are deficient in the gene for telomerase reverse transcriptase (TERT) are prone to chromosome fusions. We use Arabidopsis tert-/- mutants as a model system for analyzing terminal chromosome fusions. Here we report a novel and sensitive cytogenetic assay for the identification and characterization of chromosome-terminal fusion events by employing fluorescence in situ hybridization (FISH) with multiple probes and a repeated hybridization approach. A mixture of chromosome-specific subtelomeric probes is applied successively in 3 FISH reactions to the slides containing mitotic anaphase figures with anaphase bridges. Each figure is registered by a CCD camera after each in situ hybridization procedure. By comparing the signals presented on the bridge in successive images the assessment of the particular chromosome arms involved in fusion is possible. This experimental setup enables unambiguous identification of individual chromosome ends employed in fusion events.
Česky
Detekce dicentrických chromozomů tvořících anafázní mosty u TERT mutantů, kde jsou velice zkrácené teloméry a kde dochází s vysokou frekvencí k fúzi terminální chromozomů. Výsledkem této studie je navržení vhodných fluorescenčních prób, jejichž kombinacemi zle zjistit, které chromozómy a v jaké oblasti se na fúzi podílí.