MUSILOVÁ, Jindra a Zdeněk GLATZ. CZE separation of cellular energetically important metabolites. In EURO ANALYSIS 2009. 2009. vyd. Rakousko : Congress and Messe Innsbruck: Wolfgang Buchberger, Wolfgang Lindner, 2009, s. 478 - 478.
Další formáty:   BibTeX LaTeX RIS
Základní údaje
Originální název CZE separation of cellular energetically important metabolites
Název česky CZE separace energeticky významných buněčných metabolitů
Autoři MUSILOVÁ, Jindra a Zdeněk GLATZ.
Vydání 2009. vyd. Rakousko : Congress and Messe Innsbruck, EURO ANALYSIS 2009, od s. 478 - 478, 1 s. 2009.
Nakladatel Wolfgang Buchberger, Wolfgang Lindner
Další údaje
Originální jazyk angličtina
Typ výsledku Stať ve sborníku
Obor 10600 1.6 Biological sciences
Stát vydavatele Rakousko
Utajení není předmětem státního či obchodního tajemství
Organizační jednotka Přírodovědecká fakulta
Klíčová slova česky kapilární elektroforéza; metabolom; energetické metabolity;
Klíčová slova anglicky capillary electrophoresis; metabolom; energetic metabolites;
Příznaky Mezinárodní význam
Změnil Změnil: prof. RNDr. Zdeněk Glatz, CSc., učo 1865. Změněno: 9. 4. 2010 09:08.
Anotace
Nucleotides are essential for viability and growth of all living cells. They have at least four important functions; storage and transport of cellular metabolic energy; activation and transfer of precursors for cellular biosynthesis; synthesis of DNA and RNA; control and regulation of cellular metabolism. Their total concentration and distribution of individual species is highly dynamic with changes in environmental conditions. Monitoring the nucleotides pool is able to verify the physiological state of the cell and predict this state due to the presence or rations to each other. Due to the importance of nucleotides for metabolism, numerous methods for their determination in biological samples have been reported, mainly HPLC, CE or TLC. The main aim of this work was to find appropriate conditions for the selective and rapid determination of purine (AMP, ADP, ATP, GMP, GDP, GTP), pyrimidine (CMP, CDP, CTP, UMP, UDP, UTP) nucleotides, adenine coenzymes (NAD+, NADH, NADP+, NADPH) and Acetyl CoA using capillary electrophoresis (CE). Because of low intra and extracellular concentration of these metabolites the capillary zone electrophoresis was combined with the online preconcentration technique field enhanced sample stacking to improve the concentration sensitivities. The determination was performed in a bare fused silica capillary using separation voltage 20 kV (positive polarity) and direct detection at 260, 280 and 340 nm. For method optimization different concentrations of phosphate buffer (from 50 to 80 mM), pH range from 5 to 7 and temperature of capillary from 16 to 25 C were tested. The best resolution was found in the pH range from 5.5 to 6 for each buffer concentration; hence this pH range was examined in detail. Metabolite samples dissolved in deionised water were injected into the capillary hydrodynamically (50 mbar, 14 s).
Anotace česky
Nukleotidy jsou pro životaschopnost a růst buňky velice nezbytné. Zastávají minimálně čtyři důležité funkce: uchování a transport energie, aktivace a přenos prekurzorů biosyntézy, syntéza DNA a RNA, kontrola a regulace buněčného metabolismu. Jejich celková koncentrace i jednotlivé zastoupení je vysoce dynamické se změnami životního prostředí. Monitoring nukleotidů je významný zejména z k ověření fyziologického stavu buňky a nebo k předpovědi stavu buňky na základě získaných výsledků (množství jednotlivých nukleotidů). Z důvodu vysoké důležitosti nukletidů pro metabolismus, bylo vyvinuto hned několik metod pro jejich stanovení v biologických vzorcích, např. HPLC, CE nebo TLC. Hlavním cílem této práce bylo zoptimalizovat podmínky pro selektivní a rychlé stanovení purinových (AMP, ADP, ATP, GMP, GDP, GTP), pyrimidinových (CMP, CDP, CTP, UMP, UDP, UTP) nukleotidů, adeninových koenzymů (NAD+, NADH, NADP+, NADPH) a Acetylu CoA pomocí kapilární elektroforézy (CE). Ke zvýšení koncentrační citlivosti CE byla využita jedna z prekoncentračních technik, tzv. stacking.
Návaznosti
LC06023, projekt VaVNázev: Integrované bioanalytické technologie pro mikroanalýzy a diagnostiku s využitím LIF a hmotnostní spektrometrie
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Integrované bioanalytické technologie pro mikroanalýzy a diagnostiku s využitím LIF a hmotnostní spektrometrie
MSM0021622413, záměrNázev: Proteiny v metabolismu a při interakci organismů s prostředím
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Proteiny v metabolismu a při interakci organismů s prostředím
VytisknoutZobrazeno: 11. 5. 2024 23:21