2010
Optimization of capillary electrophoretic method for determination of physiologically relevant nucleotides and coenzymes in cell extract
MUSILOVÁ, Jindra a Zdeněk GLATZZákladní údaje
Originální název
Optimization of capillary electrophoretic method for determination of physiologically relevant nucleotides and coenzymes in cell extract
Název česky
Optimalizace CE metody pro stanovení fyziologicky významných nukleotidů a koenzymů v buněčném extraktu
Autoři
Vydání
první. Univerzita Palackého, Olomouc, Česká rep, CHEMICA 47S, s. 122-122, 2010
Nakladatel
Univerzita Palackého, Olomouc, Česká rep
Další údaje
Jazyk
angličtina
Typ výsledku
Stať ve sborníku
Obor
10600 1.6 Biological sciences
Stát vydavatele
Česká republika
Utajení
není předmětem státního či obchodního tajemství
Organizační jednotka
Přírodovědecká fakulta
ISBN
978-80-244-2470-5
ISSN
Klíčová slova česky
Nucleotide-Coenzyme-cell extract
Klíčová slova anglicky
Nukleotid-Koenzym-Buněčný extrakt
Změněno: 9. 4. 2010 08:36, prof. RNDr. Zdeněk Glatz, CSc.
V originále
Due to importance of nucleotides and coenzymes for metabolism, the main aim of this work was to optimize capillary electrophoretic method for the selective and rapid determination of 17 energetically important metabolites (purine and pyrimidine nucleotides, adenine coenzymes and Acetyl CoA). For improvement of concentration sensitivity, the capillary zone electrophoresis (CZE) was combined with the on-line preconcentration technique -field enhanced sample stacking. The optimal separation was reached by using voltage 23 kV (positive polarity)and direct detection at 260, 280 and 340 nm. 50 mM concentration of phosphate buffer (pH 5.8) provided the best resolution of peaks. Resulting method showed RSD in the range from 0.65 to 1.40 % for migration time and from 2.37 to 5.99 % for relative peak area of metabolites (n=10). Optimized method was used for analyzing of cell-extract of bacterium Paracoccus denitrificans.
Česky
Hlavním úkolem této práce bylo optimalizovat CE-metodu pro selektivní a rychlé stanovení 17 energeticky důležitých a pro metabolismus nezbytných metabolitů (purinových a pyrimidinových nukleotidů, adeninových koenzymů a Acetyl CoA). Pro zlepšení koncentrační citlivosti byla využita CZE online prekoncentrační technika-field enhanced stacking. Optimální separace byla provedena při 23 kV (pozitivní polarita)a přímé detekci při 260, 280 a 340 nm. Nejlepšího rozlišení píků bylo dosaženo s 50 mM fosfátovým pufrem, pH 5.8. Výsledná metoda dosahuje RSD v rozmezí 0.65 - 1.45 pro migrační čas a 2.37 - 5.99 pro plochu píku (n=10). Optimalizovaná metoda byla užita k analýze buněčného extraktu bakterie Paracoccus denitrificans.
Návaznosti
| LC06023, projekt VaV |
| ||
| MSM0021622413, záměr |
|