J 2010

Isolation of granulocytes: Which transcriptome do we analyze neutrophils or eosinophils?

STEJSKAL, Stanislav, Irena KRONTORÁD KOUTNÁ a Zdeněk RUČKA

Základní údaje

Originální název

Isolation of granulocytes: Which transcriptome do we analyze neutrophils or eosinophils?

Autoři

STEJSKAL, Stanislav (203 Česká republika, domácí), Irena KRONTORÁD KOUTNÁ (203 Česká republika, garant, domácí) a Zdeněk RUČKA (203 Česká republika, domácí)

Vydání

FOLIA BIOLOGICA, 2010, 0015-5500

Další údaje

Jazyk

angličtina

Typ výsledku

Článek v odborném periodiku

Obor

30102 Immunology

Stát vydavatele

Česká republika

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Impakt faktor

Impact factor: 0.729

Kód RIV

RIV/00216224:14330/10:00067250

Organizační jednotka

Fakulta informatiky

UT WoS

000286039500003

Klíčová slova anglicky

total RNA; gradient centrifugation; cell isolation; magnetic separation; gene expression; expression activity; neutrophils; eosinophils; granulocytes

Příznaky

Mezinárodní význam, Recenzováno
Změněno: 30. 7. 2013 12:13, Ing. Mgr. Věra Pospíšilíková

Anotace

V originále

Isolation of granulocyte cells from blood is necessary for accurate studying of changes in their expression. After gradient centrifugation, we obtain relatively pure granulocyte populations with different ratios of neutrophils and eosinophils. Unfortunately, in many studies in this field the expression results are not set according to the real variability of the granulocyte population. In many cases, the granulocyte population is marked simply as neutrophils and the residual population of eosinophils is not considered. Based on our recent study where we tracked the general transcription factor RNA polymerase II (RNAP II), we hypothesized that eosinophils are more transcriptionally active cells than neutrophils. We decided to test our hypothesis on isolated cells because its implications could change our view on many past expression analyses performed on granulocytes. In our experiments, we isolated neutrophils and eosinophils and measured their total RNA production. According to our results, eosinophils produce much more RNA than neutrophils. Therefore, relatively low numbers of highly active eosinophils can markedly affect the whole pool of granulocytic RNA. We want to emphasize that either a detailed description of the cell population or the use of a pure neutrophil population is necessary for the correct interpretation of neutrophil expression analysis results.

Návaznosti

MSM0021622419, záměr
Název: Vysoce paralelní a distribuované výpočetní systémy
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Vysoce paralelní a distribuované výpočetní systémy
MSM0021622430, záměr
Název: Funkční a molekulární charakteristiky nádorových a normálních kmenových buněk - identifikace cílů pro nová terapeutika a terapeutické strategie
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Funkční a molekulární charakteristiky nádorových a normálních kmenových buněk - identifikace cílů pro nová terapeutika a terapeutické strategie
2B06052, projekt VaV
Název: Vytipování markerů, screening a časná diagnostika nádorových onemocnění pomocí vysoce automatizovaného zpracování multidimenzionálních biomedicínských obrazů (Akronym: Biomarker)
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Vytipování markerů, screening a časná diagnostika nádorových onemocnění pomocí vysoce automatizovaného zpracování multidimenzionálních biomedicínských obrazů