Sample Processing and Methodological Pitfalls in Multiple Myeloma Research

POTÁČOVÁ, Anna, Jana ŠTOSSOVÁ, I. BUREŠOVÁ, Lucie KOVÁŘOVÁ, Martina ALMÁŠI, Miroslav PENKA a Roman HÁJEK. Sample Processing and Methodological Pitfalls in Multiple Myeloma Research. Online. Klinická onkologie. 2011, roč. 24, Suppl., s. 18-23. ISSN 0862-495X. [citováno 2024-04-23]

Základní údaje

• Originální název: Sample Processing and Methodological Pitfalls in Multiple Myeloma Research
• Název česky: Zpracování vzorků a metodická úskalí ve výzkumu mnohočetného myelomu
• Autoři: POTÁČOVÁ, Anna (203 Česká republika, domácí), Jana ŠTOSSOVÁ (203 Česká republika, domácí), I. BUREŠOVÁ (203 Česká republika), Lucie KOVÁŘOVÁ (203 Česká republika, domácí), Martina ALMÁŠI (203 Česká republika), Miroslav PENKA (203 Česká republika) a Roman HÁJEK (203 Česká republika, garant, domácí)
• Vydání: Klinická onkologie, 2011, 0862-495X.

Další údaje

• Originální jazyk: angličtina
• Typ výsledku: Článek v odborném periodiku
• Obor: 30200 3.2 Clinical medicine
• Stát vydavatele: Česká republika
• Utajení: není předmětem státního či obchodního tajemství
• Kód RIV: RIV/00216224:14110/11:00049835
• Organizační jednotka: Lékařská fakulta
• Klíčová slova česky: mnohočetný myelom; monoklonální gamapatie; separace buněk; CD138
• Klíčová slova anglicky: multiple myeloma; monoclonal gammopathy; cell separation; CD138
• Příznaky: Recenzováno

Anotace

In this paper, initial processing of biological material, cell separation algorithms and other procedures are discussed. For samples with initial infiltration of plasma cells > 5%, CD138 MicroBeads and Auto-Magnetic-Activated Cell Sorting program are used. Fluorescence-Activated Cell Sorting is used exclusively for cell populations with low-abundance; these samples are detected using fluorescently labeled antibodies only. Isolated plasma cells are further processed for molecular biological studies, for cytogenetics and protein analyses. Furthermore, this work examines the pitfalls of research related to multiple myeloma; some of them we have overcome, while the others are still problematic.

Anotace česky

V tomto úvodním článku pro ostatní metodiky využívané na našem pracovišti při studiu mnohočetného myelomu a monoklonálních gamapatií jsme se zaměřili na postupy vlastního zpracování biologického materiálu, principy separace buněk a nastavené algoritmy dalších postupů. Běžně používaná metodika magnetické separace buněk MACS je vhodná pouze pro vzorky se vstupní infiltrací plazmatickými buňkami > 5 %. Pro nízce zastoupené populace buněk pak využíváme výhradně metodu fluorescencí aktivované separace FACS. Izolované plazmatické buňky jsou dále využívány pro molekulárně biologické studie, pro cytogenetická vyšetření a k proteinovým analýzám. Dále se v této práci zmiňujeme o úskalích, která souvisejí s výzkumem mnohočetného myelomu, některá z nich již umíme překonat, s jinými se zatím neúspěšně potýkáme.

Návaznosti

• GAP304/10/1395, projekt VaV: Název: Analýza klonálních progenitorů plazmatických buněk u monoklonálních gamapatií

Investor: Grantová agentura ČR, Analýza klonálních progenitorů plazmatických buněk u monoklonálních gamapatií

• GP301/09/P457, projekt VaV: Název: Uplatnění multiparametrické průtokové cytometrie ve studiu patofyziologie maligních plazmatických buněk

Investor: Grantová agentura ČR, Uplatnění multiparametrické průtokové cytometrie ve studiu patofyziologie maligních plazmatických buněk

• LC06027, projekt VaV: Název: Univerzitní výzkumné centrum - Česká myelomová skupina (Akronym: LC MGUS)

Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Univerzitní výzkumné centrum - Česká myelomová skupina (URC - CMG)

• MSM0021622434, záměr: Název: Od klasických prognostických markerů ke klinicky aplikovatelným farmakogenomickým a farmakoproteomickým projektům u mnohočetného myelomu a monoklonálních gamapatií

Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Od klasických prognostických markerů ke klinicky aplikovatelným farmakogenomickým a farmakoproteomickým projektům u mnohočetného myelomu a monoklonálních gamapatií

• NS10207, projekt VaV: Název: Úloha abnormalit chromozómu 1 a kaskády NF-kappaB v patogenezi mnohočetného myelomu

Investor: Ministerstvo zdravotnictví ČR, Úloha abnormalit chromozómu 1 a kaskády NF-kappaβ v patogenezi mnohočetného myelomu

• NS10406, projekt VaV: Název: Vytvoření prognostického panelu u pacientů s monoklonální gamapatií nejasného významu s cílem zabránění transformace v maligní onemocnění.

Investor: Ministerstvo zdravotnictví ČR, Vytvoření prognostického panelu u pacientů s monoklonální gamapatií nejasného významu s cílem zabránění transformace v maligní onemocnění

• NT11154, projekt VaV: Název: Úloha mitotické disrupce v B lymfocytech u mnohočetném myelomu

Investor: Ministerstvo zdravotnictví ČR, Úloha mitotické disrupce v B lymfocytech u mnohočetného myelomu