Diplomová práce

Imunochemická stanovení s použitím fluorescenčních nanočástic

Immunochemical assays based on fluorescent nanoparticles

Bc. Patrik Gereg
Anotace

Diplomová práce studuje použití tradičního fluoroforu fluoresceinu při imunochemickém stanovení albuminu z lidského séra. Teoretická část vysvětluje problematiku imunostanovení – jejich princip, rozdělení a použití v diagnostice v místě kontaktu s pacientem. Praktická část zobrazuje prvotní postup pro studium imunochemické reakce mezi rozdílnými koncentracemi fluoresceinu a sérového albuminu za použití …více

Abstract

The diploma thesis studies use of a traditional fluorophore (fluorescein) in imunochemical assays of human serum albumin. Theoretical part deals with an immunoasay – its principle, classification and use in point-of-care diagnostics. Practical part describes initial steps for study of immunochemical reations between different concentrations of fluorescein and serum albumin using high protein-binding …více

Zadání práce
Na modelovém stanovení albuminu v moči pomocí monoklonální protilátky budou porovnány bioanalytické parametry dosažitelné s různými typy fluorescenčních značek. Budou připraveny biokonjugáty využívající kvantové tečky (QD), lanthanidové up-konvertující nanočástice (UCNP) a pro srovnání i klasický fluorofor (fluorescein, tetramethylrhodamin). Po purifikaci biokonjugátů a charakterizaci jejich fluorescečních vlastností budou studovány jejich afinitní interakce při tvorbě imunokomplexu pomocí povrchové plasmonové resonance (SPR, Biacore nebo BioNavis). FRET varianta (Forsterův rezonanční přenos energie mezi blízkými fluorofory, z nichž jeden funguje jako donor, jehož emisní pás se překrývá s absorbčním pásem akceptorového fluoroforu) poslouží k otestování homogenního imunostanovení; výsledkem je zde změna barevného rozložení emitovaného záření - po přiblížení v imunokomplexu přestává emitovat donor a místo něj emituje akceptor. Nakonec budou vyvinuta fluorescenční imunostanovení (FIA) v mikrodestičkovém formátu s vyhodnocením na systému Synergy a otestována pro měření mikroalbuminurie. Nejcitlivější varianta pak bude pokusně převedena i do formátu jednorázového papírkového stanovení (lateral flow strip immunoassay).
Práce zkontrolována:
5. 1. 2018 13:34, prof. RNDr. Petr Skládal, CSc., učo 2202
Plný text práce
1,7 MB / soubor PDF
Jazyk práce
slovenština slovenština
Termín obhajoby
14. 2. 2018
Práce nebyla obhájena

Student v rámci svého studia diplomovou práci obhájil 6. 6. 2018.

Vedoucí

prof. RNDr. Petr Skládal, CSc., učo 2202
ÚBioch Chem PřF MU

Oponent

doc. Mgr. Zdeněk Farka, Ph.D., učo 357740
NABI CSB CEITEC MU

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.