Disertační práce

Non-invasive contactless identification and characterization of microorganisms by Raman spectroscopy and optical micromanipulations

Mgr. Silvie Bernatová, učo 106731
Anotace

Ramanova spektroskopie (RS) od svého prvního experimentálního ověření v roce 1928 prodělala mnoho instrumentálních revolucí, které jsou nyní patrné v široké základně použití této analytické metody. Aplikační oblast RS zahrnuje obory od: Pevných látek a materiálových věd, ověření pravosti map a uměleckých děl, forenzní vědy až po biochemické a biologické aplikace. RS je hojně využívána při identifikaci …více

Abstract

Since its discovery in 1928, Raman spectroscopy (RS) has passed through many instrumental revolutions, which manifests in the range of application fields of this analytical method. The application fields include solid state physics and materials science, authentication of maps and works of art, forensic science and biochemical and biological applications. RS is widely used for the identification of …více

Zadání práce
Současné optické mikromanipulační techniky zahrnují řadu unikátních nástrojů a postupů, které umožňují např. prostorovou lokalizaci mikroobjektů (včetně živých buněk) ve světelném svazku (tzv. optická pinzeta), 3D manipulace s několika mikroobjekty, bezkontaktní a sterilní separaci mikroobjektů či složek suspenzí, povrchové uspořádání mikročástic a jejich transport. Optická pinzeta využívá jednoho fokusovaného laserového svazku k zachycení mikroobjektů a k jejich manipulaci v prostoru. Vlnová délka je volena tak, aby nebyla objektem pohlcována a objekt zůstal nepoškozený. Velmi aktuální jsou kombinace optických mikromanipulačních metod s bezkontaktní a neinvazivní Ramanovou mikrospektroskopií, která poskytuje informaci o molekulárním složení zkoumaného vzorku. V posledních několika letech se začíná ramanovská spektroskopie využívat k identifikaci mikroorganismů, protože každý mikroorganismu má unikátní ramanovské spektrum (tzv. „fingerprint“). Obě techniky lze sloučit s mikrofluidními systémy, které umožňují řídit složení kapalného média, vytvářet difúzní rozhranní mezi různými kapalinami, přes které lze organizmy přesouvat např. optickou pinzetou, vytvářet oddělené mikrokomůrky, ve kterých lze mikroorganismy izolovat a sledovat jejich reakci ramanovskou spektroskopií. Hlavním cílem doktorandské disertační práce bude kombinovat výše zmíněné techniky tak, aby bylo možné využít Ramanovu mikrospektroskopii ke studiu molekulárního složení jednotlivých mikroorganismů (bakterií a eukaryotických buněk) suspendovaných v kapalném médiu a sledovat odezvy mikroorganismů na definované vnější stimuly či stresové faktory. Předpokládá se, že doktorant/ka zvládne obsluhu a modifikaci experimentálního systému realizovaného v Ústavu přístrojové techniky AV CŘ, v.v.i., bude analyzovat ramanovská spektra prostřednictvím vhodných matematických algoritmů, navrhne vhodné konfigurace mikrofluidních čipů podle studovaných mikroorganismů. Alternativně bude zkoumáno zesílení intensity spekter Ramanova rozptylu v blízkosti kovových mikrostruktur (technika SERS - Surface Enhanced Raman Spectroscopy) vytvořených v mikrofluidních čipech. Nalezené postupy a získané výsledky významně přispějí k rychlé identifikaci mikroorganismů a zhodnocení jejich odezvy na stresující faktory včetně medikamentů. V rámci disertační práce se předpokládá experimentální a teoretická činnost v Ústavu přístrojové techniky AV ČR,v.v.i., který disponuje potřebným vybavením. Pracoviště spolupracuje s řadou evropských laboratoří zabývajících se spřízněnou problematikou, což nabízí uchazeči možnost zahraničních stáží a rychlý odborný růst.
Práce zkontrolována:
13. 7. 2017 12:14, prof. RNDr. Pavel Zemánek, Ph.D., učo 32642
Plný text práce
53,7 MB / soubor PDF
Jazyk práce
angličtina angličtina
Termín obhajoby
26. 9. 2017
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

prof. RNDr. Pavel Zemánek, Ph.D., učo 32642
ext ÚTFA Fyz PřF MU

Oponenti

Mgr. Alexandr Jonáš, Ph.D.
Istanbul Technical University
prof. RNDr. Radim Chmelík, Ph.D.
FSI VUT

Konzultant

Mgr. Ota Samek, Dr.
ext ÚChem Chem PřF MU

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.