Bakalářská práce

Vývoj metody pro studie afinitních interakcí s využitím kapilární elektroforézy v on-line uspořádání

Development of method for affinity interaction studies based on capillary electrophoresis in on-line setup

Teťana Bržezická
Anotace

Kapilární elektroforéza (CE) patří k významným separačním technikám díky celé řadě výhod, mezi které řadíme malou spotřebu vzorku, rychlost analýz a vysokou účinnost separace. CE lze kromě klasické separace využít také ke studiu afinitních interakcí, kde lze vyzdvihnout zejména možnost studia analytů ve volném roztoku bez nutnosti jejich imobilizace či značení. Běžně užívaným CE módem v afinitních …více

Abstract

Capillary electrophoresis (CE) is frequently used separation technique due to its numerous advantages including low sample consumption, high speed of analysis and high separation efficiency. CE is commonly used for separation, but it can be also used for studies of affinity interaction. The benefits of this approach are the possibility of studying interactions in the free solution without the necessity …více

Zadání práce
Interakce mezi vazebnými partnery lze charakterizovat z hlediska jejich mechanismu a síly. Mezi nejčastěji používané metody k charakterizaci patří např. řada spektroskopických metod (UV VIS spektroskopie, fluorimetrie, atd.), kalorimetrické metody, ultracentrifugace, rovnovážná dialýza, kapalinová chromatografie, a v neposlední řadě i kapilární elektroforéza (CE). Obecné výhody CE jsou vysoká účinnost, rychlost analýz, nízká spotřeba vzorku a reagencií a možnost automatizace. Na rozdíl od jiných technik lze při studiu interakcí pomocí CE vyzdvihnout možnost interakce ve volném roztoku a nativní stav interakčních partnerů. Běžně užívaným CE módem v afinitních studiích je kapilární elektroforéza - frontální analýza (CE-FA), která využívá k přípravě vzorků tzv. off-line uspořádání. Reakční směs je tedy připravována v reakční nádobce a CE slouží pouze pro separaci. Při přípravě vzorků v tzv. on line uspořádání slouží křemenná kapilára nejen jako separační kolona, ale také jako reakční prostor k smíchání vzorku. Celý proces je tak plně automatizován a všechny dílčí kroky probíhají uvnitř CE systému. Cílem bakalářské práce by mělo být provedení literární rešerše na dané téma a následně optimalizovat metodu CE-FA využívající on-line uspořádání pro přípravu vzorku.
Práce zkontrolována:
15. 5. 2019 10:17, Mgr. et Mgr. Lenka Kohútová, Ph.D., učo 268714
Plný text práce
1,4 MB / soubor PDF
Jazyk práce
čeština čeština
Termín obhajoby
24. 6. 2019
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

Mgr. et Mgr. Lenka Kohútová, Ph.D., učo 268714
ÚBioch Chem PřF MU

Oponent

Mgr. Andrea Celá, Ph.D.

Konzultant

prof. RNDr. Zdeněk Glatz, CSc., učo 1865
ÚPF Teorie LF MU

Literatura

  • Affinity capillary electrophoresis in pharmaceutics and biopharmaceutics. Edited by Reinhard Neubert - Hans-Hermann Rüttinger. New York: Marcel Dekker, 2003, xi, 362. ISBN 0824709519.
  • Biophysical approaches determining ligand binding to biomolecular targets : detection, measurement and modelling. Edited by A. D. Podjarny - Annick Dejaegere - Bruno Kieffer. Cambridge: RSC Publishing, 2011, xv, 356. ISBN 9781849730099.

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.