Sekvence TTTAGGG/CCCTAAA reprezentuje kanonickou telomerovou repetici rostlin a je považována za původní rostlinný telomerový motiv. I když míra evoluční konzervativnosti tohoto telomerového motivu je vysoká, byly identifikovány rostlinné druhy s telomerami tvořenými odlišnými sekvencemi; a takových rostlin stále přibývá. V evoluci rostlinných telomer hrála velmi pravděpodobně důležitou roli telomerová RNA (TR). Jde o nekódující RNA, která obsahuje templátové místo, podle kterého druhá esenciální podjednotka enzymového komplexu telomerázy, telomerázová reverzní transkriptáza (TERT), syntetizuje G-bohaté vlákno telomery. V bakalářské práci budou shrnuty současné poznatky o evoluci telomerové repetice rostlin a významu TR v tomto procesu.
V experimentální části budou metodou TRF (terminal restriction fragments) analyzovány telomery v rostlinách A. thaliana s nefunkčním genem kódujícím TR a v těchto mutantech transformovaných konstruktem nesoucím TR s templátovou sekvencí odpovídající telomerové repetici savců (TTAGGG/CCTAAA).

Tato bakalářská práce je součástí širší studie, jejímž cílem je pochopením mechanismů evoluční adaptace rostlin na změny sekvence telomerové repetice.

Cíle práce

Teoretická část:

• Telomery rostlin, mechanismy jejich udržování a sekvenční diverzita.

Praktická část:

• Pěstování rostlin A. thaliana s nefunkčním genem kódujícím TR a mutantů transformovaných konstruktem s lidskou teplátovou sekvencí
• Izolace DNA, analýza délek telomer metodou TRF; pro hybridizaci budou použity radioaktivně značené sondy reflektující rostlinný i savčí telomerový motiv.