Diplomová práce

Příprava a charakterizace polyklonálních protilátek proti pod-jednotkám pozitivních elongačních faktorů

Generation and characterization of polyclonal antibodies against parts of positive elongation factors

Bc. Martina Sklenářová, B.Sc., učo 268966
Anotace

V této diplomové práci se věnuji testování polyklonálních protilátek z králičích sér (CDK13-C, CDK13-N, CycK-1-61) a kozího séra (CDK13-532) pro metody Western blot, imunoprecipitace, nepřímé imunofluorescence a imunohistochemie. Tato polyklonální séra byla připravena proti cyklinu K a kináze CDK13. Důvodem byl fakt, že v období zadání diplomové práce, nebyly komerčně dostupné protilátky proti cycklinu …více

Abstract

This thesis is focused on testing the polyclonal antibodies from rabbit sera (C-CDK13, CDK13-N-CycK 1-61) and goat serum (CDK13-532) in use of Western blot, immunoprecipitation, indirect immunofluorescence and immunohistochemistry. The polyclonal sera were prepared against cyclin K and kinase CDK13. The reason was the fact that at the beginning the diploma work, there were not commercially available …více

Klíčová slova
polyklonální protilátky CDK13 CDK12 CycK P-TEFb Western blot imunoprecipitace imunochemie polyclonal antibodies immunoprecipitation immunochemistry
Zadání práce
Genová exprese je primárně řízena na úrovni transkripce specifických mRNA pomocí RNA polymerázy II (RNAPII). Transkripční cyklus lze rozdělit do tří základních fází: iniciace, elongace a terminace transkripce. Kontrola elongační fáze transkripce je pro valnou většinu genů, od bezobratlích po savce, zcela klíčovým aspektem jejich regulace. Pozitivní transkripční elongační faktor b (P-TEFb) je odpovědný za správný průběh elongační fáze v buňce. Aktivní P-TEFb se skládá z cyklin-dependentní kinázy 9 (Cdk9) a cyklinu T1 nebo T2. V neaktivním stavu je navíc P-TEFb komplex složen z 7SK snRNA, hexamethylene bisacetamide inducible protein 1 (Hexim1), 7SK snRNA methylphosphate capping enzyme (MEPCE) a La-related protein 7 (LARP7). V dnešní době je podrobnější výzkum neaktivních P-TEFb komplexů limitován nedostatkem protilátek proti MEPCE a LARP7 proteinům. Hlavním cílem předloženého tématu diplomové práce je příprava králičích protilátek proti těmto proteinům a jejich následné testování pro účely western blotové analýzy, imunoprecipitace a technik nepřímé imunofluorescence.
Administrativní informace
Práce zkontrolována:
20. 5. 2013 09:35, doc. Mgr. Jiří Kohoutek, Ph.D., učo 19829
Plný text práce
1,6 MB / soubor PDF
Jazyk práce
čeština čeština
Termín obhajoby
5. 6. 2013
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

doc. Mgr. Jiří Kohoutek, Ph.D., učo 19829
ÚBioch Chem PřF MU

Oponent

doc. Mgr. Jiří Kohoutek, Ph.D., učo 19829
Citovat tuto práci
Masarykova univerzita Přírodovědecká fakulta
Studijní program
Biochemie
Obor

Práce na příbuzné téma

Seznam prací, které mají shodná klíčová slova.

Podobné práce

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.

  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.

  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.

  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.

  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.