Bakalářská práce

Imunochromatografická stanovení s foton-upkonverzními nanočásticemi pro detekci biologicky významných analytů

Lateral flow immunoassays with photon-upconversion nanoparticles for the detection of biologically relevant analytes

Katarína Pfefferová
Anotace

Na konci roku 2019 se v Číně objevila nová koronavirová infekce nazývaná Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 (SARS-CoV-2). Genom SARS-CoV-2 je složen z cca 30 000 nukleotidů, které kódují čtyři strukturální proteiny – spike (S) protein, obalový (E) protein, transmembránový (M) protein a nukleokapsidový (N) protein. Nukleokapsidový protein (NP) je velmi důležitým antigenem pro koronavirus …více

Abstract

At the end of the year of 2019 in China, new coronavirus infection called Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 (SARS-CoV-2) was discovered. Genome of SARS-CoV-2 is made up of approximately 30 000 nucleotides, which encode four structural proteins – spike (S) protein, envelope (E) protein, membrane (M) protein and nucleocapsid (N) protein. Nucleocapsid protein is very important antigen for …více

Zadání práce
Imunochromatografická stanovení typu lateral flow immunoassay (LFIA) představují jednu z nejrozšířenějších metod pro rychlou detekci biologicky významných analytů, jako jsou patogeny nebo biomarkery. Tyto testy typicky kombinují proužky z nitrocelulózové membrány se zlatými nanočásticemi, které slouží jako značka, a umožňují tak rychlé provedení stanovení s vizuálním odečtem signálu. Omezená citlivost konvenčních LFIA testů však neumožňuje detekovat patogeny s nízkou infekční dávkou a biomarkery přítomné v malých koncentracích. Jednou z možností zvýšení citlivosti je použití nanomateriálů s luminiscenčními vlastnostmi, jako jsou např. foton-upkonverzní nanočástice (UCNPs), které vykazují anti-Stokesovu luminiscenci (po excitaci infračerveným zářením emitují viditelné světlo), a mohou tak být detekovány bez interference pozadí.
Cílem této práce bude vývoj LFIA stanovení s využitím UCNPs jako citlivé luminiscenční značky. Nejprve bude zvolen vhodný analyt (např. nukleoprotein z koronaviru SARS-CoV-2 nebo prostatický specifický antigen) a imunoreagencie budou otestovány v enzymovém stanovení typu ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). Následně budou připraveny konjugáty UCNPs se streptavidinem nebo specifickou protilátkou, které budou charakterizovány metodou dynamického rozptylu světla a otestovány v imunostanovení typu ULISA (upconversion-linked immunosorbent assay) na mikrotitrační destičce. Následně bude vyvinuto a optimalizováno LFIA stanovení, nejprve proběhnou analýzy modelových vzorků, na ně bude navazovat detekce v komplexních biologických vzorcích (např. sliny nebo krevní sérum).
Práce zkontrolována:
26. 5. 2023 10:13, doc. Mgr. Zdeněk Farka, Ph.D., učo 357740
Plný text práce
1,8 MB / soubor PDF
Jazyk práce
čeština čeština
Termín obhajoby
5. 6. 2023
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

doc. Mgr. Zdeněk Farka, Ph.D., učo 357740
ÚBioch Chem PřF MU

Oponent

Ing. Jakub Máčala, Ph.D., učo 514003
ÚBioch Chem PřF MU

Konzultant

Mgr. Eliška Macháčová
ÚBioch Chem PřF MU

Literatura

  • HLAVÁČEK, Antonín; Zdeněk FARKA; Matthias Jürgen MICKERT; Uliana KOSTIV; Julian BRANDMEIER; Daniel HORÁK; Petr SKLÁDAL; František FORET a Hans-Heiner GORRIS. Bioconjugates of photon-upconversion nanoparticles for cancer biomarker detection and imaging. Nature Protocols. Springer Nature, 2022, roč. 17, April 2022, s. 1028-1072. ISSN 1754-2189. Dostupné z: https://doi.org/10.1038/s41596-021-00670-7.

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.