Diplomová práce

Velkokapacitní sekvenování jako nástroj při studiu paleoparazitologických nálezů a jeho využití pro srovnání parazitárních infekcí u vesnické a raně městské populace

High-throughput sequencing as a tool for studying paleoparasitological finds and its use for comparing parasitic infections in rural and early urban populations

Bc. Kristýna Kuklová, učo 499936
Anotace

Diplomová práce se zabývá analýzou paleoparazitologických vzorků ze sedmi archeologických lokalit metodou velkokapacitního sekvenování. Celkem bylo analyzováno 85 vzorků z hrobových lokalit z 11. století a 10 kontrolních vzorků ze 13. až 14. století. Analýza byla zaměřena na sekvenování oblasti 18S rDNA širokého spektra střevních parazitů pomocí platformy Illumina. Vzorky byly analyzovány v centrální …více

Abstract

In this master’s thesis, paleoparasitological samples from seven archeological sites were analyzed using high-throughput sequencing. A total of 85 samples from 11th century burial sites and 10 control samples from the 13th and 14th centuries were analyzed. The analysis focused on sequencing the 18S rDNA region of a broad spectrum of intestinal parasites using the Illumina platform. The samples were …více

Zadání práce
Tradičně jsou paleoparazitologické vzorky vyšetřeny klasickými koproskopickými metodami, na které navazuje inspekce pomocí mikroskopu. Díky nízké záchytnosti parazitů v paleomateriálu se v posledních letech přistupuje k modernějším metodám založených na studiu DNA. Analýza DNA se provádí amplifikací nukleových kyselin pomocí PCR reakce, na kterou tradičně navazuje Sangerovo sekvenování. Jeho nevýhodou je možnost čtení pouze jedné sekvence, proto se diagnostika zaměřuje na jediného parazita, avšak paraziti tvoří celá společenstva. Sangerovo sekvenování bylo postupně nahrazeno metodami nové generace, které umožnují zpracování velkého množství dat čili popis celých komunit. Navrhovaná práce se zaměří na přípravu parazitárních DNA vzorků, knihovny pro velkokapacitní sekvenování a následné bioinformatické zpracování. Cílem práce bude použít zoptimalizovanou metodiku pro detekci komunit helmintů u populace Slovanů z pohřebiště na Vídeňské ulici v Brně a porovnat ji s nálezy z lokalit pocházejících ze stejného období (11. století), ale nápadně se lišících velikostí populace a frekvencí pohybu obyvatel. Lokalita na dnešní Vídeňské ulici byla křižovatkou cest mezi Prahou a Vídní a můžeme o ní uvažovat jako o raně městské populaci, zatímco ostatní lokality (např. naleziště u Olšan) mají vesnický charakter bez pohybu obyvatel. Studie napomůže k rozšíření a posunu diagnostických metod v oblasti paleoparazitologického výzkumu, a rovněž přispěje k porozumění parazitárních infekcí u raně městských a vesnických populací slovanských obyvatel mladší doby hradištní.
Zadání práce
1. Optimalizace metodiky zpracování paleoparazitologických vzorků pomocí vysokokapacitního sekvenování a bioinformatických a statistických analýz
2. Realizace vlastní studie, vyšetření vzorků ze získaných lokalit, srovnání nálezů
3. Interpretace a diskuse výsledků
4. Sazba diplomové práce, odevzdání práce v IS MU

K získání zápočtu za první semestr (předmět Bi7771 Diplomová práce I) je třeba splnit výše uvedený bod 1, k získání zápočtu za druhý semestr (předmět Bi8772 Diplomová práce II) je třeba splnit i výše uvedený bod 2, k získání zápočtu za třetí semestr (předmět Bi9200 Diplomová práce III) je třeba splnit i výše uvedený bod 3 a k získání zápočtu za čtvrtý semestr (předmět Bi9773 Diplomová práce IV) je třeba splnit i výše uvedený bod 4, a tedy dokončit práci a odevzdat ji k obhajobě do Archívu prací v IS. Doporučený rozsah práce je 50–100 stran, může však být větší, pokud to zpracování zadaného tématu vyžaduje, nikoliv však menší. Práce bude obsahovat explicitní popis použitého materiálu a metod, a to i v případě práce přehledové/rešeršní, v metodickém postupu bude jasně vyjádřený přínos autora k získaným výsledkům. Citačním stylem bude česká verze stylu ISO 690. Součástí práce budou vhodné sumarizace a vyobrazení v podobě tabulek a grafů. Práce bude odevzdána v elektronické formě ve formátu PDF do IS a v tištěné formě v knižní vazbě v počtu 1 kopie pro účely obhajoby a archivace. Práce bude po stránce formální i obsahové v souladu s aktuálně platnou legislativou MU, platným Opatřením děkana k závěrečným pracím a s interními předpisy Ústavu antropologie.
Práce zkontrolována:
26. 5. 2024 22:12, Mgr. Barbora Pafčo, Ph.D., učo 269851
Plný text práce
5,4 MB / soubor PDF
Jazyk práce
angličtina angličtina
Termín obhajoby
18. 6. 2024
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

Mgr. Barbora Pafčo, Ph.D., učo 269851
ÚAntr Biol PřF MU

Oponent

RNDr. Bohumil Sak, Ph.D.
Biologické centrum AVČR, Parazitologický ústav

Konzultanti

doc. RNDr. Miroslav Králík, Ph.D., učo 18313
ÚAntr Biol PřF MU
Mgr. Eva Nosková, Ph.D.
abs PřF MU

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.