Diplomová práce

Metody separace spermií pro IVF na základě chemotaxe

Sperm separation methods for IVF based on chemotaxis

Karolína Lošťáková
Anotace

Tato práce zkoumá využití chemotaxe pro separaci lidských spermií v asistované reprodukci. Cílem bylo ověřit chemotaktickou odpověď spermií na acetylcholin a porovnat ji se standardní separací swim-up. Výsledky potvrdily přítomnost ACh ve folikulární tekutině i kultivačním médiu kumulárních buněk. Chemotaktický test však neprokázal zlepšení parametrů spermiogramu ani integrity DNA a vedl k poklesu …více

Abstract

This thesis investigates the use of chemotaxis for human sperm separation in assisted reproduction. The aim was to evaluate the chemotactic response of sperm to acetylcholine and compare it with the standard swim-up separation. Results confirmed the presence of ACh in follicular fluid and cumulus cell culture media. However, the chemotactic assay showed no improvement in sperm parameters or DNA integrity …více

Zadání práce
Současné metody in vitro fertilizace jsou stále častěji realizovány mikroinkjekcí spermií přímo do cytoplazmy zralého lidského oocytu. Tento přístup je velice efektivní, ale důležitou podmínkou pro jeho úspěšnou realizaci je bezchybný výběr spermií před jejich použitím pro oplozování. Pro výběr spermií existuje několik metod založených na různém principu. Nejpoužívanější jsou nyní separační metody swim-up a hustotní gradient, které však jsou postupně nahrazovány řadou nových separačních systémů. Většina těchto nových metod je založena na motilitě spermií, jako hlavním separačním parametru. Metody postavené na principu pozitivní chemotaxe jsou ojedinělé, přestože mají zajímavý potenciál a mohou v budoucnu hrát větší roli v tomto procesu. Cílem této práce je identifikace látek produkovaných kumulárními buňkami, které přitahují spermie pozitivní chemotaxí. Během řešení této práce proběhne in vitro kultivace kumulárních buněk, následně bude kultivační médium analyzováno v biochemické laboratoři a budou sledovány nově vytvořené proteiny a steroidy produkované kulturou kumulárních buněk. Na základě těchto výsledků bude testován vliv analyzovaných látek na spermie. Bude ověřen jak vliv identifikovaných látek, tak také vliv vlastního kultivačního média. Následně budou vybrané látky využity pro separaci spermií pozitivní chemotaxí. Vyseparované spermie budou hodnoceny z hlediska jejich motility, koncentrace, morfologie a integrity DNA. Pro potřeby hodnocení míry fragmentace DNA spermií bude využit Holasperm kit G2.
Práce zkontrolována:
6. 5. 2026 08:26, doc. Ing. Michal Ješeta, Ph.D., učo 118226
Plný text práce
1,7 MB / soubor PDF
Jazyk práce
čeština čeština
Termín obhajoby
4. 6. 2026
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

doc. Ing. Michal Ješeta, Ph.D., učo 118226
ÚHE Teorie LF MU

Oponent

doc. Ing. Jan Nevoral, Ph.D.
LF MU

Masarykova univerzita Lékařská fakulta
Plán
Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví - Embryolog
  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.