D 2009

Determination of adenosine, inosine and hypoxanthine in human plasma by high performance liquid chromatography

KLEPÁRNÍK, Martin a Josef TOMANDL

Základní údaje

Originální název

Determination of adenosine, inosine and hypoxanthine in human plasma by high performance liquid chromatography

Název česky

Stanovení adenosinu, inosinu a hypoxanthinu v plazmě pomocí HPLC

Autoři

KLEPÁRNÍK, Martin a Josef TOMANDL ORCID

Vydání

Zlín, VITAMINS, NUTRITION, DIAGNOSTICS 2009, The Abstract Book, s. 149-356, 2009

Nakladatel

Univerzita Tomáše Bati ve Zlíně

Další údaje

Jazyk

angličtina

Typ výsledku

Stať ve sborníku

Obor

10406 Analytical chemistry

Stát vydavatele

Česká republika

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Označené pro přenos do RIV

Ne

Organizační jednotka

Lékařská fakulta

ISBN

978-80-7318-809-2

Klíčová slova česky

inosin; hypoxanthin; adenosin; HPLC

Klíčová slova anglicky

inosine; hypoxanthine; adenosine; HPLC

Příznaky

Mezinárodní význam
Změněno: 26. 1. 2010 10:40, doc. RNDr. Josef Tomandl, Ph.D.

Anotace

V originále

Inosine and hypoxanthine are endogenous low molecular plasma constituents normally found at low concetrations (200-400 ng/mL) in human plasma resulting from dietary and endogenous purine metabolism. Using the mouse model, inosine levels increased from cardiac tissue subjected to cardiac oxidative stress and may serve as potential biomarker indicative of early cardiac ischaemia. We report here development of a new HPLC method for the determination of adenosine, inosine and hypoxanthine using ultra-violet (UV) detection. Before analysis, plasma samples were deproteinized by centrifugal filtration through 10-kDa cut-off membranes. The protein-free ultrafiltrates were analysed on a monolithic reversed phase column Chromolith Performance RP-18e using gradient elution and UV detection at 250nm. Mobile phase consisted of 25 mM acetate buffer and methanol, the flow rate was 1mL/min. Optimal wavelength were confirmed by absorption spectra of inosine and hypoxanthine. Plasma levels of analytes were quantified on the basis of peak area using external standardization.

Česky

Inosine and hypoxanthine are endogenous low molecular plasma constituents normally found at low concetrations (200-400 ng/mL) in human plasma resulting from dietary and endogenous purine metabolism. Using the mouse model, inosine levels increased from cardiac tissue subjected to cardiac oxidative stress and may serve as potential biomarker indicative of early cardiac ischaemia. We report here development of a new HPLC method for the determination of adenosine, inosine and hypoxanthine using ultra-violet (UV) detection. Before analysis, plasma samples were deproteinized by centrifugal filtration through 10-kDa cut-off membranes. The protein-free ultrafiltrates were analysed on a monolithic reversed phase column Chromolith Performance RP-18e using gradient elution and UV detection at 250nm. Mobile phase consisted of 25 mM acetate buffer and methanol, the flow rate was 1mL/min. Optimal wavelength were confirmed by absorption spectra of inosine and hypoxanthine. Plasma levels of analytes were quantified on the basis of peak area using external standardization.

Návaznosti

LC06023, projekt VaV
Název: Integrované bioanalytické technologie pro mikroanalýzy a diagnostiku s využitím LIF a hmotnostní spektrometrie
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Integrované bioanalytické technologie pro mikroanalýzy a diagnostiku s využitím LIF a hmotnostní spektrometrie
MSM0021622402, záměr
Název: Časná diagnostika a léčba kardiovaskulárních chorob
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Časná diagnostika a léčba kardiovaskulárních chorob