Diplomová práce

Zvýšení citlivosti a reprodukovatelnosti Thioflavin T metody pro studium fibrilizace fosforylovaného Tau proteinu

Enhancing the Sensitivity and Reproducibility of the Thioflavin T Assay for Studies of Phosphorylated Tau Fibril Formation

Bc. Romana Halová, učo 521879
Anotace

Diplomová práce zkoumá fibrilaci tau proteinu fosforylovaného GSK‑3β pomocí ThT kinetiky a AFM. Popisuje optimalizaci podmínek, charakterizaci fibril a poskytuje metodický rámec pro studium tau agregace.

Abstract

This thesis investigates the fibril formation of tau protein phosphorylated by GSK‑3β using ThT kinetics and AFM. It optimizes reaction conditions, characterizes fibrils, and provides a framework for studying tau aggregation.

Klíčová slova
Tau protein fibrilizace Thioflavin T fosforylace mikroskopie atomárních sil fibril formation phosphorylation Atomic Force Microscopy
Zadání práce
Anotace:
Tau protein fyziologicky stabilizuje mikrotubuly, které zajišťují axonální transport a správnou funkci neuronů. Jeho hyperfosforylace narušuje tuto funkci, vede k tvorbě neurofibrilárních filamentů a představuje klíčový patologický znak Alzheimerovy choroby. Tato diplomová práce se zaměřuje na in vitro přípravu rekombinantního fosforylovaného Tau proteinu, sledování jeho fibrilizace a optimalizaci reprodukovatelnosti a citlivosti tohoto procesu. Průběh fibrilizace bude sledován fluorescenčním testem pomocí Thioflavinu T a výsledek vizualizován mikroskopií atomárních sil. Tyto metody tak umožní spolehlivější studium nepravidelného a obtížně reprodukovatelného procesu fibrilizace. 
 
Literatura:
XUE, Christine; LIN, Tiffany Yuwen; CHANG, Dennis a GUO, Zhefeng. Thioflavin T as an amyloid dye: fibril quantification, optimal concentration and effect on aggregation. Online. Royal Society Open Science. 2017, vol. 4, no. 1, s. 160696. ISSN 2054-5703. Dostupné z: https://doi.org/10.1098/rsos.160696.  

GUO, Tong; NOBLE, Wendy a DIANE P. HANGER. Roles of tau protein in health and disease. Online. Acta Neuropathologica. 2017, vol. 133, no. 5, s. 665-704. ISSN 0001-6322. Dostupné z: https://doi.org/10.1007/s00401-017-1707-9. 

KUČINSKAS, Gytis, Aneta KOZELEKOVÁ, Katarína KRÁĽOVÁ, Viliam VOLKO, Ondřej ŠEDO a Jozef HRITZ. 14-3-3-zeta protein prevents formation of GSK3-beta phosphorylated Tau protein fibrils. International Journal of Biological Macromolecules. 2025, 148222-148222. ISSN 0141-8130. Dostupné z: https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2025.148222
Administrativní informace
Práce zkontrolována:
19. 5. 2026 12:43, doc. RNDr. Mgr. Jozef Hritz, Ph.D., učo 107254
Plný text práce
11,4 MB / soubor PDF
Jazyk práce
angličtina angličtina
Termín obhajoby
9. 6. 2026
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

doc. RNDr. Mgr. Jozef Hritz, Ph.D., učo 107254
NCBR PřF MU

Oponent

Ondrej Cehlár

Konzultant

Pavle Križan, učo 255112
BNMRS CSB CEITEC MU
Citovat tuto práci
Masarykova univerzita Přírodovědecká fakulta
Studijní program
Plán
Biomolekulární chemie

Práce na příbuzné téma

Seznam prací, které mají shodná klíčová slova.

Podobné práce

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.

  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.

  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.

  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.

  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.