Tauopatie jsou neurodegenerativní onemocnění spojená s misfoldingem a agregací tau proteinu do toxických oligomerů a tvorbou nerozpustných neurofibrilárních depozitů. Poruchy ve funkci tau proteinu a buněčná toxicita tau fibril mají negativní dopad na intracelulární transport, narušují energetický metabolismus, způsobují abnormality v degradačních procesech neuronů a vedou k poruchám přenosu vzruchů synapsemi. Přestože víme, že k těmto poruchám buněčných procesů dochází, není zcela jasné, jaký je jejich mechanismus a jakou roli v nich tau přesně hraje. Jednou z cest k lepšímu pochopení mechanismů buněčných změn způsobených tauopatiemi, je přímá vizualizace pomocí technik in situ kryo-elektronové mikroskopie, dovolující rozlišení v jednotkách nanometrů. Náplň diplomové práce je vizualizace procesů odehrávajících se v neuronech v důsledku působení patologických tau proteinových fibril pomocí in situ kryo-elektronové tomografie a fluorescenční mikroskopie s cílem popsat internalizaci tau fibril do buňky a vztahy mezi tau fibrily a organelami (cytoskeletem, mitochondriemi a degradačním aparátem buňky). Díky získaným datům bude možné ověřit a rozšířit existující hypotézy o mechanismech tauopatie, například zda sekvestrací tau do fibril opravdu dochází k destabilizaci mikrotubulů a jejich rozpadu, nebo zjistit jakým způsobem je narušen degradační proces tau fibril. Jako model neuronů budou použity neuroblastomy a případně jiné buněčné modely. Harmonogram 2023/2024 - Literární rešerše, značení tau proteinových fibril, optimalizace internalizace fibril, ověření internalizace pomocí fluorescenční mikroskopie. 2024/2025 - Příprava buněčných lamel, sběr tomografických dat, rekonstrukce a segmentování tomogramů, vyhodnocení dat, sepsání práce