Diplomová práce

Určení dimer-monomerní rovnováhy proteinu 14-3-3

Determination of the dimer-monomer equilibrium of the 14-3-3 protein

Bc. Veronika Weisová
Anotace

14-3-3 proteiny jsou rodina regulačních proteinů, které ovlivňují různé biologické procesy u eukaryontních organizmů. Aktivní jsou hlavně v dimerní formě. Avšak, dimerní forma může být regulována fosforylací Ser-58 nebo bodovými mutacemi, což má za následek posun dimer-monomerní rovnováhy. V rámci této diplomové práce jsem připravila konstrukt 14-3-3ζ proteinu, který může být specificky fluorescenčně …více

Abstract

14-3-3 proteins are family of regulatory proteins that affect various biological processes in eukaryotic organisms. They are active mainly in its dimeric form. However, dimeric form can be regulate by phosphorylation of Ser-58 or point mutations resulting in a shift of dimer-monomer equilibrium. In this diploma thesis, I prepared construct of 14 3 3ζ protein that can be specifically fluorescently labelled …více

Klíčová slova
14-3-3 dimerizace kinetika fluorescence FRET zhášení dimarization kinetics quenching
Zadání práce
V současnosti je známo více než 800 proteinů, které se po fosforylaci vážou do proteinu 14-3-3, což následně vede k modulaci jejich aktivity. Protein 14-3-3 dominantně tvoří v nativní formě dimerní strukturu. Kvalitativně bylo prokázáno, že dimer-monomerní rovnováha je ovlivněna fosforylací Ser58, resp. zavedením vybraných mutací na dimerním rozhraní proteinu 14-3-3. Cílem této diplomové práce bude kvantifikovat dimer-monomerní rovnováhu pro divoký typ 14-3-3zeta a jeho vybrané modifikované formy s použitím sady biofyzikálních metod pro stanovení oligomerního stavu proteinu. Diplomant se seznámí s přípravou modifikovaných 14-3-3zeta proteinů a analýzou jejich velikosti pomocí nativní elektroforézy, analytické gelové chromatografie, SAXS a fluorescenčních experimentálních metod. Diplomová práce může být vypracována v českém, slovenském nebo anglickém jazyce. Literatura: 1. Gardino AK, Smerdon SJ, Yaffe MB. Structural determinants of 14-3-3 binding specificities and regulation of subcellular localization of 14-3-3-ligand complexes: A comparison of the X-ray crystal structures of all human 14 3 3 isoforms. Seminars in Cancer Biology 2006, 16, 173-182. 2. Yaffe MB, Rittinger K, Volinia S, Caron PR, Aitken A, Leffers H, Gamblin SJ, Smerdon SJ, Cantley LC. The structural basis for 14-3-3 : phosphopeptide binding specificity. Cell 1997, 91, 961-971. 3. Woodcock JM, Murphy J, Stomski FC, Berndt MC, Lopez AF. The dimeric versus monomeric status of 14-3-3zeta is controlled by phosphorylation of Ser58 at the dimer interface. J Biol Chem 2003, 278, 36323-36327.
Administrativní informace
Práce zkontrolována:
22. 5. 2016 18:42, doc. RNDr. Mgr. Jozef Hritz, Ph.D., učo 107254
Plný text práce
1,5 MB / soubor PDF
Jazyk práce
angličtina angličtina
Termín obhajoby
16. 6. 2016
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

doc. RNDr. Mgr. Jozef Hritz, Ph.D., učo 107254
BNMRS CSB CEITEC MU

Oponent

Ing. Blanka Pekárová, Ph.D., učo 236500
Citovat tuto práci
Masarykova univerzita Přírodovědecká fakulta
Studijní program
Biochemie
Obor

Práce na příbuzné téma

Seznam prací, které mají shodná klíčová slova.

Podobné práce

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.

  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.

  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.

  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.

  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.