Diplomová práce

Endotoxiny sinicových vodních květů – efekty a mechanismy netoxických koncentrací in vitro.

Endotoxins of cyanobacterial water blooms – effects and mechanisms of non-toxic concentrations in vitro.

Bc. Kateřina Pospíchalová
Anotace

Sinice a sinicové vodní květy produkují biologicky aktivní látky, které mohou mít ne-gativní vliv na lidské zdraví, ať už při vodních rekreačních aktivitách nebo při požití kontaminované vody. Tato expozice může u lidí vyvolat podráždění kůže, očí, nevol-nosti, alergie a onemocnění gastrointestinálního traktu. Součástí buněčné stěny sinic i gramnegativních heterotrofních bakterií, které jsou významnou …více

Abstract

Cyanobacteria and cyanobacterial water blooms produce biologically active sub-stances that can have negative effects on human health, either during aquatic recre-ational activities or from ingestion of contaminated water. This exposure can cause skin and eye irritation, nausea, allergies, and gastrointestinal tract disease in hu-mans. Lipopolysaccharides (LPS) are an important part of the cell wall …více

Zadání práce
Studentka se zapojí do dlouhodobého výzkumu v oblasti prozánětlivých efektů lipopolysacharidů (LPS) environmentálních směsí sinicových vodních květů. Vzorky z biomas získaných z rekreačních ploch České republiky budou využity k ovlivnění společné kultury diferencovaných Caco2 buněk jako in vitro modelu lidského střevního epitelu a PBMC (peripheral blood mononuclear cells) získaných od zdravých dárců. Bude sledována produkce prozánětlivých cytokinů a aktivace imunitních buněk. Cílem této části práce je zmapovat prozánětlivý potenciál endotoxinů reálných environmentálních směsí a za pomoci analýz druhového složení biomas na spolupracujícím pracovišti doc. Babicy (RECETOX) případně vytipovat druhy sinic či bakterií, které by mohly indikovat zvýšené riziko pro lidské zdraví. Studentka se zároveň bude podílet na přípravě TLR4-/- a TLR2-/- klonů THP-1 buněk a jejich využití ke studiu mechanismu působení LPS sinice Aphanizomenon flos-aquae. Zadání práce vychází z dosavadních výsledků skupiny prokazujících bioaktivitu tohoto LPS v širokém spektru použitých buněčných modelů (keratinocyty, enterocyty, makrofágy) a naznačujících, že aktivace probíhá přes jiný než TLR4 receptor. Studijní plán: 1. semestr (podzim 2021) - studentka si osvojí práci s buněčnými kulturami, izolaci PBMC z plné krve, detekci pomocí metody ELISA a přípravu vzorků na vícebarevnou flowcytometrickou analýzu. Prakticky se zapojí do běžících experimentů. 2. semestr (jaro 2022) - předpokládané dokončení experimentů na kokulturách, vyhodnocení dat. Dále se studentka zapojí do zavádění přípravy klonů a jejich charakterizace - detekce exprese receptorů pomocí flow cytometrie a/nebo western blottingu. 3. semestr (podzim 2022) - experimenty studující mechanismus působení LPS Aphanizomenon flos-aquae za využití připravených klonů a zvládnutých metod buněčné a molekulární biologie. Zároveň bude vedena k přípravě diplomové práce - příprava osnovy a následně teoretické části DP. 4. semestr (jaro 2023) - dokončení experimentů, vyhodnocení dat, zpracování praktické části DP a diskuse, finální úpravy.
Práce zkontrolována:
16. 5. 2023 05:58, RNDr. Lenka Šindlerová, Ph.D., učo 10672
Plný text práce
2,6 MB / soubor PDF
Jazyk práce
čeština čeština
Termín obhajoby
29. 6. 2023
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

RNDr. Lenka Šindlerová, Ph.D., učo 10672
Zivoc ÚEB Biol PřF MU

Oponent

Mgr. Jiřina Medalová, Ph.D., učo 176525
Zivoc ÚEB Biol PřF MU

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.