Diplomová práce

Detekce estrogenů pomocí kompetitivního imunostanovení s foton-upkonverzními nanočásticemi

Detection of estrogens using competitive immunoassay based on photon-upconversion nanoparticles

Bc. Terezie Zatloukalová
Anotace

Estrogenní sloučeniny vyskytující se ve vodním prostředí způsobují poruchy endokrinního systému živých organismů včetně člověka. Tyto látky účinkují již ve velmi nízkých koncentracích, a proto je důležité mít k dispozici citlivé metody pro jejich detekci. Specifickou a citlivou kvantifikaci estrogenů umožňují imunochemická stanovení založená na interakci protilátky s antigenem. Zlatým standardem v …více

Abstract

Estrogenic compounds in the aquatic environment cause endocrine disruption in living organisms, including humans. These substances are effective at very low concentrations, making sensitive methods for their detection of utmost importance. Specific and sensitive quantitation of estrogens is possible by immunochemical assays based on antibody antigen interaction. The gold standard in diagnostics is …více

Zadání práce

Sloučeniny s estrogenní aktivitou představují rozsáhlou skupinu látek přírodního i antropogenního původu. Patří mezi ně estrogenní hormony (estradiol, estriol a estron) a také řada tzv. endokrinních disruptorů, které jsou definovány jako exogenní látky interferující s přirozenými hormony v těle. Tyto látky jsou účinné již při velmi nízkých koncentracích, a tak i jejich stopová množství v životním prostředí mohou mít významný vliv na živé organizmy. Proto je nutné mít k dispozici velmi citlivé metody pro detekci estrogenů v environmentálních vzorcích, nejčastěji využívané jsou separační metody a imunochemická stanovení.

Cílem této diplomové práce bude vývoj kompetitivního imunochemického stanovení pro detekci estrogenů (např. 17-beta-estradiolu) s využitím značek na bázi foton-upkonverzních nanočástic (UCNPs). UCNPs vykazují anti-Stokesovu luminiscenci (absorpce dvou nebo více fotonů v infračervené oblasti vede k vyzáření jednoho fotonu v oblasti viditelné), a mohou tak být detekovány s vyšší citlivostí než konvenční značky na bázi enzymů a fluorescenčních molekul. Nejprve bude zvolen vhodný formát imunostanovení (využívající buď konjugát estrogenu s proteinem imobilizovaný na povrchu a kompetující s volným estrogenem o vazbu volné protilátky, nebo konjugát estrogenu s UCNP kompetující s estrogenem o vazbu na protilátku na povrchu) a budou připraveny vhodné konjugáty UCNPs. Samotné nanočástice i jejich konjugáty budou charakterizovány pomocí transmisní elektronové mikroskopie, dynamického rozptylu světla a analýzou trajektorie nanočástic. Následně proběhne vývoj a optimalizace imunostanovení s cílem dosáhnout co nejnižšího limitu detekce. Praktický potenciál metody bude nakonec ověřen analýzou reálných vzorků povrchových vod.

Práce zkontrolována:
15. 5. 2025 10:23, doc. Mgr. Zdeněk Farka, Ph.D., učo 357740
Plný text práce
3,5 MB / soubor PDF
Jazyk práce
čeština čeština
Termín obhajoby
23. 6. 2025
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

doc. Mgr. Zdeněk Farka, Ph.D., učo 357740
ÚBioch Chem PřF MU

Oponent

Mgr. Karel Lacina, Ph.D., učo 77968
Nanobio CSB CEITEC MU

Literatura

  • HLAVÁČEK, Antonín; Miroslav PETEREK; Zdeněk FARKA; Matthias J. MICKERT; Leonhard PRECHTL; Dietmar KNOPP a Hans H. GORRIS. Rapid single-step upconversion-linked immunosorbent assay for diclofenac. Microchimica Acta. Vienna: Springer, 2017, roč. 184, č. 10, s. 4159-4165. ISSN 0026-3672. Dostupné z: https://doi.org/10.1007/s00604-017-2456-0.
  • HLAVÁČEK, Antonín; Zdeněk FARKA; Matthias Jürgen MICKERT; Uliana KOSTIV; Julian BRANDMEIER; Daniel HORÁK; Petr SKLÁDAL; František FORET a Hans-Heiner GORRIS. Bioconjugates of photon-upconversion nanoparticles for cancer biomarker detection and imaging. Nature Protocols. Springer Nature, 2022, roč. 17, April 2022, s. 1028-1072. ISSN 1754-2189. Dostupné z: https://doi.org/10.1038/s41596-021-00670-7.

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.