Pohyb buněk

Úvodní slovo

Většina pohyblivých bakterií se pohybuje pomocí bičíku, který je ukotven na vnější části plazmatické membrány a v buněčné stěně. Bičík má v průměru zhruba 20 nm a je 15–20 µm dlouhý. Bičík je mikroskopicky viditelný až po obarvení, které zvětší jeho tloušťku. Umístění bičíku na buňce může být různé (obr. 74).

Bakteriální bičík je složen ze tří základních částí. Nejdelší část tvoří vlákno, bazální tělo je usazeno v buňce a s vláknem je spojeno háčkem. Vlákno je duté a pevné, složené pouze z jediného proteinu, flagelinu. Rozdíly ve stavbě bičíku u gramnegativních a grampozitivních bakterií jsou znázorněny na obr. 75.

Směr rotace bičíku určuje povahu pohybu bakterie (obr. 76). Kromě pohybu pomocí bičíku se bakterie přirozeně pohybují Brownovým pohybem. Spirochety a helikální bakterie se mohou pohybovat slizem díky tzv. axiálnímu filamentu. Dalším typem pohybu bakterií je klouzavý pohyb, např. u cyanobakterií, některých druhů myxobakterií a mykoplazmat. Ačkoli nemají žádné viditelné struktury spjaté s klouzavým pohybem, mohou dosahovat rychlosti až 3 µm za sekundu.

Vlastnosti vybraných mikroorganizmů

Bacillus

rovné tyčky po dvojicích nebo v řetízcích se zakulacenými nebo čtvercovými konci; grampozitivní; peritrichální; tvorba endospor

Pseudomonas

gramnegativní; rovné či mírně zakřivené tyčky; jeden či několik polárních bičíků

Proteus

gramnegativní; rovné tyčky; peritrichální bičíky

E. coli

gramnegativní; jednotlivé tyčky či ve dvojicích; peritrichální bičíky

Seznam přístrojů, materiálu a mikroorganizmů

Mikroorganizmy

• mladé kultury (4 nebo 16 hodinové)

• Bacillus cereus CCM 2010

• Pseudomonas fluorescens CCM 2115T

• Proteus vulgaris CCM 1799

• Escherichia coli CCM 3954

• Micrococcus luteus CCM 169 – pro srovnání nativního preparátu, nepohyblivý

Postup

Při pozorování bičíků se nesmí pracovat se skleněnými předměty (krom sklíček), protože snadno ulamují bičíky. Pracovat s mladými kulturami 4-16 hodin starými vždy z tekutého média, staré buňky odhazují bičíky.

Pozorování pohybu bičíku

Visutá kapka

• Připravit nativní preparát, kapku suspenze buněk z média pipetovat na podložní sklo.
• Nepřekrývat krycím sklem, pozorování objektivem 20x při Nomarského kontrastu, nezanořovat!
• Pro vitalitu buněk je důležitý dostatek kyslíku, citlivější buňky se hýbou jen nahoře.
• Nutno opatrně přiostřovat na horní část kapky.

Barvení bičíků (obr. 77)

Barva obsahuje mořidlo tanin, které se obalí kolem bičíku, zvětší jeho průměr a zviditelní ho.

• Připravit nativní preparát na odmaštěné podložní sklo a opatrně překrýt krycím sklem.
• Vedle krycího sklíčka kápnout barvičku pro barvení bičíků.
• Barvičku prosát filtračním papírem a preparát pozorovat při zvětšení 1000x s imerzí.

Pozorování pohybu na agaru pro testování pohybu

Médium obsahuje nízké procentuální množství agaru, polotekuté médium (nižší viskozita prostředí).

• Na agar se očkuje jen do středu misky, aby se rozrůstala 1 kolonie.
• Kličku s kulturou zanořit ve středu misky do agaru.
• Pohyblivé kultury udělají rozrůstající se kruh, někdy vlnící se. Nepohyblivé rostou jen v místě vpichu do určité velikosti.
• Výsledky za 3-5 dní. S miskou se nesmí hýbat.

U rodu Proteus lze využít jak tuhé (fenomén příbojové vlny, plazivý nárůst), tak polotekuté médium (plavání buněk v médiu).

Složení Luria-Bertani swarming média s 0,7 % agarem: 100 ml destilované vody, 1 g enzymatického hydrolyzátu kaseinu, 0,5 g kvasničného extraktu, 1 g NaCl, 0,7 g agaru.

Zhodnocení cvičení

Další informace k této problematice najdete v následující literatuře

Kontrolní otázky