BENEŠ, Petr, Vendula MACEČKOVÁ a Jan ŠMARDA. THE ROLE OF VIMENTIN EXPRESSION IN MONOCYTE/MACROPHAGE DIFFERENTIATION. In XIII. Cytoskeletální Klub. Ústav molekulární genetiky Akademie věd: Společnost pro buněčnou biologii při Československé biologické společnosti. s. 27-27. 2005.
Další formáty:   BibTeX LaTeX RIS
Základní údaje
Originální název THE ROLE OF VIMENTIN EXPRESSION IN MONOCYTE/MACROPHAGE DIFFERENTIATION
Název česky VÝZNAM EXPRESE VIMENTINU PŘI MONOCYTICKÉ/MAKROFÁGOVÉ DIFERENCIACI
Autoři BENEŠ, Petr (203 Česká republika, garant), Vendula MACEČKOVÁ (203 Česká republika) a Jan ŠMARDA (203 Česká republika).
Vydání Ústav molekulární genetiky Akademie věd, XIII. Cytoskeletální Klub, od s. 27-27, 1 s. 2005.
Nakladatel Společnost pro buněčnou biologii při Československé biologické společnosti
Další údaje
Originální jazyk angličtina
Typ výsledku Stať ve sborníku
Obor Genetika a molekulární biologie
Stát vydavatele Česká republika
Utajení není předmětem státního či obchodního tajemství
Kód RIV RIV/00216224:14310/05:00012447
Organizační jednotka Přírodovědecká fakulta
Klíčová slova anglicky vimentin; monocyte/macrophage differentiation; phagocytosis; gene expression; siRNA
Štítky GENE EXPRESSION, monocyte/macrophage differentiation, phagocytosis, siRNA, vimentin
Změnil Změnil: prof. RNDr. Jan Šmarda, CSc., učo 1223. Změněno: 21. 12. 2006 12:17.
Anotace
Differentiation of various cells is accompanied by changes in expression of genes coding for intermediate filament (IF) proteins. These changes could be either qualitative causing a switch of expression to different type of IF protein or quantitative causing production of different amount of the same IF protein. During differentiation of hemopoietic cells dramatic changes in expression, intracellular localization and structural organization of vimentin occurs. Monocytes/macrophages are the only blood cells with fully developed vimentin network in cytoplasm. The aim of this study was to explore the role of vimentin expression during monocyte/macrophage differentiation using the v-myb-transformed monoblastic cell line (BM2) as a model. An increase of intracellular level of vimentin was confirmed during phorbol ester TPA or trichostatin A (TSA) induced differentiation of BM2 cells using western blotting. Moreover, we demonstrated the presence of fully developed network of vimentin in cytoplasm of differentiated BM2 cells using indirect immunoflourescence. We used siRNA strategy to prepare stable clones of BM2 cells with vimentin level reduced to 30%. At the same time, we prepared BM2 cells inducibly expressing this IF protein. We did not observed any difference in proliferation or in response to TPA or TSA in BM2 cells with increased expression of vimentin in comparison with BM2 control cells. In contrast, modest decrease in proliferation rate and marked reduction of ability to form macrophage polykaryons and decreased phagocytic activity upon TPA or TSA treatment were observed. These results demonstrate that alterations in expression and/or organization of vimentin network in cytoplasm are important pre-requisites for formation of fully functional macrophage polykaryons during monocyte/macrophage differentiation.
Anotace česky
Diferenciace buněk různých typů je provázena změnami v expresi genů kódujících proteiny intermediárních filamentů (IF). Tyto změny mohou mít povahu kvantitativní, projevující se změnou účinnosti exprese téhož genu, nebo kvalitativní, která se projeví tvorbou jiného IF proteinu. Během diferenciace krevních buněk dochází k výrazným změnám exprese, lokalizace a strukturního uspořádání IF proteinu vimentinu. Na rozdíl od ostatních krevních buněk se zralé monocyty/makrofágy vyznačují přítomností rozvinuté sítě vimentinových filamentů. Cílem této práce bylo studium významu výrazného zvýšení exprese vimentinu během monocytické/makrofágové diferenciace. Jako model byla použita monoblastová buněčná linie transformovaná onkogenem v-myb (BM2). Westernovým přenosem jsme potvrdili, že během diferenciace buněk BM2 indukované forbolovým esterem TPA, respektive trichostatinem A (TSA) dochází k nárůstu intracelulární hladiny vimentinu. Nepřímou imunoflourescencí jsme prokázali u diferencujících buněk BM2 přítomnost bohaté sítě vimentinových filamentů v cytoplazmě. Pomocí strategie založené na siRNA se nám podařilo připravit stabilní klony BM2 s hladinou vimentinu sníženou o 70%. Zároveň jsme transfekcí plazmidu s vimentinovou cDNA pod kontrolou metalothioneinového promotoru získali stabilní klony BM2 inducibilně exprimující vimentin. U buněk BM2 se zvýšenou expresí vimentinu jsme nepozorovali významný rozdíl v proliferaci a TPA, respektive TSA indukované diferenciaci ve srovnání s mateřskou linií. Zatímco buňky BM2 se sníženou hladinou vimentinu měly mírně sníženou rychlost růstu, výrazně omezenou schopnost tvorby makrofágových polykaryonů a sníženou schopnost fagocytózy po působení TPA, respektive TSA. Uvedené výsledky naznačují, že změny v expresi, respektive struktuře cytoplazmatické sítě vimentinových IF jsou důležitou podmínkou tvorby plně funkčních makrofágových polykaryonů během monocytické/makrofágové diferenciace.
Návaznosti
GA301/03/1055, projekt VaVNázev: Studium molekulárních mechanismů způsobujících supresi v-Myb s využitím přístupů proteomiky
Investor: Grantová agentura ČR, Studium molekulárních mechanismů způsobujících supresi v-Myb s využitím přístupů proteomiky
GP301/03/D022, projekt VaVNázev: Úloha vimentinu v monocytické/makrofágové diferenciační dráze
Investor: Grantová agentura ČR, Úloha vimentinu v monocytické/makrofágové diferenciační dráze
MSM0021622415, záměrNázev: Molekulární podstata buněčných a tkáňových regulací
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Molekulární podstata buněčných a tkáňových regulací
VytisknoutZobrazeno: 16. 4. 2024 20:38